Taq稀释缓冲液

PCR 不必“摸条件”

,Taq PCR MasterMix 扩增产物可用于 T/A 克隆。本产品加入特殊稳定剂，37 ℃ 温度下 48 h仍然保持 95% 以上的扩增效率．储存条件： -20 ℃ 一年有效，多次冻融不会影响活性，经常使用可放置于 4 ℃。 本品为适应大部分 PCR 反应需要，Taq 酶量是按照 PCR 反应酶量上限所加，如出现 PCR 反应非特异性扩增明显或者背景过高，可将 Taq PCR MasterMix 反应液适当稀释后使用，可改善 PCR 扩增效果。 PCR 反应液： 组成成分 50

一种优化的PCR 方法——降落PCR 扩增目的基因

温度下再反应10 个循环并重新分析;在恒定的退火温度下对起始DT PCR 产物的10 倍稀释物(1 :10～1 :1000) 重新作30 个循环的扩增;使用更多的模板量,并在原始PCR 混合物中掺入一定稀释度的阳性模板检测其中是否存在抑制物;改变缓冲液各成分的浓度(pH、Taq 聚合酶、dNTP、引物) ; 在PCR 混合物中加入增强剂;用嵌套式引物重新扩增第1 次PCR 产物的稀释物(1 :10～1 :1000) ;放弃此套引物,重新设计引物扩增。 如果观察到许多产物带或高分子量成片产物,可采取以下

PCR 基因扩增原理与步骤大解析

的 PCR 反应体系由如下组分组成：DNA 模板、反应缓冲液、dNTP、MgCl 2 、两个合成的 DNA 引物、耐热 Taq 聚合酶。 除了典型的 PCR 外，人们还根据各种用途设计了各种不同的 PCR。如： 1.RT-PCR，即在 mRNA 反转录之后进行的 PCR。 2.反向 PCR，常规 PCR 允许扩增两引物之间的 DNA 区段，而反向 PCR 则可以对靶DNA 区段之外的两侧未知的 DNA 序列进行扩增。 3.不对称 PCR，常规 PCR 使用的引物浓度相同，而不对称 PCR 使用的引物