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PCR 基因扩增原理与步骤大解析

的 PCR 反应体系由如下组分组成：DNA 模板、反应缓冲液、dNTP、MgCl 2 、两个合成的 DNA 引物、耐热 Taq 聚合酶。 除了典型的 PCR 外，人们还根据各种用途设计了各种不同的 PCR。如： 1.RT-PCR，即在 mRNA 反转录之后进行的 PCR。 2.反向 PCR，常规 PCR 允许扩增两引物之间的 DNA 区段，而反向 PCR 则可以对靶DNA 区段之外的两侧未知的 DNA 序列进行扩增。 3.不对称 PCR，常规 PCR 使用的引物浓度相同，而不对称 PCR 使用的引物

PCR 的这些小知识，您都知道吗？

。 对于 Taq DNA 聚合酶，缓冲液中一个常见组分是来自 KCl 的 K+，其可促进引物的吸附。有时（NH4）2 SO4 可替代 KCl，NH4+ 有去稳定作用，尤其对于错配碱基间的弱氢键，因此可增强反应特异性。 ...................... 对于 PCR，看似简单，其实蕴藏了很多的学问，本篇只是其中一小部分。想看更多的内容，欢迎访问我们的学习园地，就在 thermofisher.com/mbschool。 文章来源：赛默飞世尔科技

PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶

PCR 酶数量如此之多，选择正确的酶可能是一项挑战。用于扩增 DNA 的各种酶的保真性、扩增速度和特异性各不相同。以下三个问题可以帮助您解答选择 PCR 酶时需要重点关注的因素。 Q 1：您需要确保序列准确性吗？ 有时您只需要检测 PCR 产物或估算其大小，例如在对小鼠进行基因分型或筛选重组克隆时。对于这种类型的常规 PCR 分析，您应该使用标准的热稳定 DNA 聚合酶（如 Taq DNA 聚合酶）来确认目的 DNA 存在与否。 但是，如果要执行克隆实验或下一代测序（NGS），那么准确性至关