- 询价
- 上海谷研
- GOY-C6668
- 进口、国产
- 2025年12月19日
10 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
39
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海谷研
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
详见说明书
产品名称：KspAI (HpaI) (10 U/µL)
Enzyme:KspAI(HpaI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferB
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:CpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
ThermoScientificKspAI(HpaI)restrictionenzymerecognizesGTT^AACsitesandcutsbestat37°CinBbuffer.SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.Isoschizomers:HpaI.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•Southernblotting•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
KspAI (HpaI) (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
CKB Polyclonal Antibody抗凝驴血（无菌）英文: CKB Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
PSMC6 Polyclonal Antibody二倍体细胞专用胎牛血清英文: PSMC6 Polyclonal Antibody别名 二倍体细胞胎牛血清
ACAA1 Polyclonal Antibody巴比西鼠血清（无菌过滤）英文: ACAA1 Polyclonal Antibody储存条件 -20℃
CMA1 Polyclonal Antibodyγ照射处理胎牛血清英文: CMA1 Polyclonal Antibody别名 γ照射胎牛血清
CATD (light chain,Cleaved-Gly65) Polyclonal Antibody狗血清（无菌过滤）英文: CATD (light chain,Cleaved-Gly65) Polyclonal Antibody储存条件 -20℃
JDP2 Polyclonal Antibody脱纤维驴血（无菌）英文: JDP2 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
E2 tag Monoclonal Antibody细胞生物学>细胞培养基英文: E2 tag Monoclonal Antibody
BSG Polyclonal AntibodyDMEM(H)(含双抗，不含酸钠)英文: BSG Polyclonal Antibody别名 Dulbecco'sModifiedEagleMedium
PAPD7 Polyclonal AntibodyRPMIMedium1640（含双抗）英文: PAPD7 Polyclonal Antibody别名 1640培养基
LRP1 Polyclonal Antibody内皮细胞培养基ECM英文: LRP1 Polyclonal Antibody英文 EndothelialCellMedium
DAO Polyclonal AntibodyDMEM(低糖，含双抗)英文: DAO Polyclonal Antibody英文 DMEM(L)
MBP Polyclonal AntibodyL-15培养基英文: MBP Polyclonal Antibody别名 L-15培养基
H1F0 Polyclonal AntibodyMEM培养基,NEAA,Gibco英文: H1F0 Polyclonal Antibody英文 MEMNEAA
ARF4 Polyclonal AntibodyRPMI1640Medium,PowderGibco英文: ARF4 Polyclonal Antibody英文 1640Medium
TLR8 Polyclonal AntibodyDMEM无糖培养基英文: TLR8 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃，避光，有效期1年
Akt3 Polyclonal AntibodyMRS培养基英文: Akt3 Polyclonal Antibody有效期1年
KspAI (HpaI) (10 U/µL)人促泌素elisa检测试剂盒
英文名称:Human SCGN ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:4 pg/ml
检测目标:SCGN / Secretagogin
应用:Sandwich ELISA
Enzyme:KspAI(HpaI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferB
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:CpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
ThermoScientificKspAI(HpaI)restrictionenzymerecognizesGTT^AACsitesandcutsbestat37°CinBbuffer.SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.Isoschizomers:HpaI.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•Southernblotting•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
KspAI (HpaI) (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
CKB Polyclonal Antibody抗凝驴血（无菌）英文: CKB Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
PSMC6 Polyclonal Antibody二倍体细胞专用胎牛血清英文: PSMC6 Polyclonal Antibody别名 二倍体细胞胎牛血清
ACAA1 Polyclonal Antibody巴比西鼠血清（无菌过滤）英文: ACAA1 Polyclonal Antibody储存条件 -20℃
CMA1 Polyclonal Antibodyγ照射处理胎牛血清英文: CMA1 Polyclonal Antibody别名 γ照射胎牛血清
CATD (light chain,Cleaved-Gly65) Polyclonal Antibody狗血清（无菌过滤）英文: CATD (light chain,Cleaved-Gly65) Polyclonal Antibody储存条件 -20℃
JDP2 Polyclonal Antibody脱纤维驴血（无菌）英文: JDP2 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
E2 tag Monoclonal Antibody细胞生物学>细胞培养基英文: E2 tag Monoclonal Antibody
BSG Polyclonal AntibodyDMEM(H)(含双抗，不含酸钠)英文: BSG Polyclonal Antibody别名 Dulbecco'sModifiedEagleMedium
PAPD7 Polyclonal AntibodyRPMIMedium1640（含双抗）英文: PAPD7 Polyclonal Antibody别名 1640培养基
LRP1 Polyclonal Antibody内皮细胞培养基ECM英文: LRP1 Polyclonal Antibody英文 EndothelialCellMedium
DAO Polyclonal AntibodyDMEM(低糖，含双抗)英文: DAO Polyclonal Antibody英文 DMEM(L)
MBP Polyclonal AntibodyL-15培养基英文: MBP Polyclonal Antibody别名 L-15培养基
H1F0 Polyclonal AntibodyMEM培养基,NEAA,Gibco英文: H1F0 Polyclonal Antibody英文 MEMNEAA
ARF4 Polyclonal AntibodyRPMI1640Medium,PowderGibco英文: ARF4 Polyclonal Antibody英文 1640Medium
TLR8 Polyclonal AntibodyDMEM无糖培养基英文: TLR8 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃，避光，有效期1年
Akt3 Polyclonal AntibodyMRS培养基英文: Akt3 Polyclonal Antibody有效期1年
KspAI (HpaI) (10 U/µL)人促泌素elisa检测试剂盒
英文名称:Human SCGN ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:4 pg/ml
检测目标:SCGN / Secretagogin
应用:Sandwich ELISA
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
and additions: 1.To make saturated culture combine 5 ml of YPD with 25µl of 0.4% adenine and 1 blob of yeast.Incubate at 30℃ for 18 to 24 hr until yeast is at a density of 2.0 x108 cells/ml. 2.Grow cells to an OD600 of ~1.0 after inoculating 1 liter of YPD
Purification of TFIIIC from yeast
and additions: 1.To make saturated culture combine 5 ml of YPD with 25µl of 0.4% adenine and 1 blob of yeast.Incubate at 30℃ for 18 to 24 hr until yeast is at a density of 2.0 x108 cells/ml. 2.Grow cells to an OD600 of ~1.0 after inoculating 1 liter of YPD
/GCAY TauI GCSG/C FspI TGC/GCA Tth111I GACN/NNGTC GdiII CGGCCR,-5,-1 XbaI T/CTAGA HgaI GACGC,5,10 XhoI C/TCGAG HpaI GTT/AAC XmnI GAANN/NNTTC KasI G/GCGCC ZraI GAC/GTC
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
KspAI (HpaI) (10 U/µL)
询价
