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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
51
- 英文名:
AnnealingBufferforDNAOligos,5×
- 保质期:
有效期1年
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
支
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品名称:DNA退火缓冲液(5X)
别名:DNA退火缓冲液(5X)
英文名称:AnnealingBufferforDNAOligos,5×
储存条件:-20℃,有效期1年
外观(性状):液体
单位:支
DNA退火缓冲液(AnnealingBufferforDNAOligos),即DNA寡核苷酸退火缓冲液,该退火缓冲液不仅可以用于常规的DNAOligo的退火,而且特别适合于较难退火的用于siRNA质粒构建的DNAOligo的退火。使用DNA退火缓冲液(5×)可以有效避免DNAOligo自身形成发夹结构,并且两条Oligo退火后可以直接和经酶切纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。 使用本试剂操作非常简单,只需把待退火的DNAOligo和DNA退火缓冲液(5×)按照一定比例混合后,置于PCR仪上,约60分钟即可完成。
注意事项:
● 溶液PE 第一次使用前请按瓶上标签加入4 倍体积的无水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 无水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 无水乙醇,使用后立即盖紧盖子。
● 本产品对电泳使用的Agarose 种类没有严格限制,可以使用普通Agarose 。为了保证回收DNA 的质量和DNA 回收效率,希望使用高纯度的Agarose ,但没有必要一定要使用低熔点的Agarose 等。
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液,以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间,在条带分离清晰后进行切胶回收,以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率,切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小,或DNA 初始量少,回收率将会偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 片段可直接用于各种酶促反应等,不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率,请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的片段。
● 请严格按照操作步骤操作。
使用方法:
一:用新鲜组织样品
1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积(1g组织需10mL)。
2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的zui长存放时间,如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到zui后的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液。常见存放温度与其zui长存放时间关系为如下:
6. 从存放处取出样品 (-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化),用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
7. 立即开始RNA 提取或进行其他处理 (如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。
以下是DNA退火缓冲液(5X)的相关产品:
PYCR1 Polyclonal Antibody资源名称:人NK细胞英文: PYCR1 Polyclonal Antibody 种属 :NKL
RBBP7 Polyclonal Antibody资源名称:小鼠B细胞淋巴瘤英文: RBBP7 Polyclonal Antibody 种属 :A20
QARS Polyclonal Antibody资源名称:小鼠脑神经胶质母细胞英文: QARS Polyclonal Antibody 种属 :G422
CAPN10 Polyclonal Antibody资源名称:人外周血单核细胞英文: CAPN10 Polyclonal Antibody 种属 :PBMC
RPS16 Polyclonal Antibody资源名称:小鼠肺泡巨噬细胞英文: RPS16 Polyclonal Antibody 种属 :MH-S
CCL8 Polyclonal Antibody资源名称:人皮肤成纤维细胞英文: CCL8 Polyclonal Antibody 种属 :HSAS3
PRC1 Polyclonal Antibody资源名称:人甲状腺乳头状癌细胞英文: PRC1 Polyclonal Antibody 种属 :BCPAP[B-CPAP]
RPL3 Polyclonal Antibody资源名称:小鼠血管内皮瘤细胞英文: RPL3 Polyclonal Antibody 种属 :EOMA
TRPC4 Polyclonal Antibody资源名称:新生牛鼻甲细胞英文: TRPC4 Polyclonal Antibody 种属 :BT
SERPINB9 Polyclonal Antibody资源名称:人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞,英文: SERPINB9 Polyclonal Antibody 种属 :NK-92
PER1 Polyclonal Antibody资源名称:人急性非B非T淋巴细胞白血病英文: PER1 Polyclonal Antibody 种属 :Reh
PHF1 Polyclonal Antibody资源名称:小鼠肥大细胞瘤细胞英文: PHF1 Polyclonal Antibody 种属 :P815
TIMM10B Polyclonal Antibody资源名称:人胃癌细胞(2013年新引进)(干细胞库保藏)英文: TIMM10B Polyclonal Antibody 种属 :NCI-N87
ZNF408 Polyclonal Antibody资源名称:小鼠骨髓瘤细胞英文: ZNF408 Polyclonal Antibody 种属 :SP2/0
SYNPO Polyclonal Antibody资源名称:人卵巢腺癌细胞英文: SYNPO Polyclonal Antibody 种属 :OVCAR-3
SRPR Polyclonal Antibody资源名称:人皮肤鳞状 细胞癌细胞英文: SRPR Polyclonal Antibody 种属 :Colo-16
DNA退火缓冲液(5X)人巨噬细胞移动抑制因子elisa检测试剂盒
英文名称:Human MIF ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:15 pg/ml
检测目标:MIF
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验碘化物缓冲液: 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM EDTA, 4 M NaCl。室温避光贮存。不知道这里面哪个是需要避光的?我怎么没有提出DNA来,不知道是为什么?用的是NEB手册上写的方法。1. 按上述方法进行噬菌斑扩增,在第一步离心后,将500 µl含噬菌体上清转入一新鲜离心管。2. 加200 µl PEG/NaCl,颠倒混匀,室温放置10 min。3. 离心10 min,弃上清液。4. 短暂离心,小心吸去残余上清。5. 沉淀物彻底重悬于100 µl碘化物缓冲液中
一、实验概要 PCR 扩增目标 DNA 片段。 二、实验原理 多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)基本原理类似于 DNA 的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR 由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板 DNA 的变性:模板 DNA 经加热至 93℃ 左右一定时间后,使模板 DNA 双链或经 PCR 扩增形成的双链 DNA 解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备; 2. 模板 DNA 与引物
多聚酶链式反应( PCR) 是在模板DNA、引物和4 种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖DNA 聚合酶的酶促反应[1 ] 。在实验室日常工作中经常出现两种情况:一种是因未找到最佳扩增条件导致产生大量非特异性产物,另一种情况是未扩增出任何产物。影响PCR 的因素很多,除了受 PCR 仪器性能的制约外,也取决于反应体系和反应条件的设置,其中Mg2+ 浓度、缓冲液pH 值、循环条件等因素尤为重要,而循环条件中的退火温度又是至关重要的因素。降落PCR 是一种设计多循环以使相连循环的退火
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