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- 2025年12月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
51
- 英文名：
MarkerⅡDNALadder
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
上海谷研
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
支
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
产品名称：Marker Ⅱ DNA Ladder
别名:MarkerⅡDNALadder
英文名称:MarkerⅡDNALadder
储存条件:-20℃，有效期1年
外观（性状）:液体
单位:支
MarkerⅡDNALadder是由单独制备的PCR产物混合而成，共有6条DNA片段，已加入上样缓冲液，可以直接电泳，每次上样5μl。为便于电泳后观察，特异性加强800bp条带，其浓度约为100ng/5μl，其它条带的DNA浓度约为50ng/5μl。参考片段(bp)：200、400、600、800、1000、1500
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
Marker Ⅱ DNA Ladder在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
以下是公司正在热销的产品：
AHRR Polyclonal Antibody 种属 Psychrobacter│nivimaris英文: AHRR Polyclonal Antibody应用领域极端微生物/耐冷菌
L3MBTL3 Polyclonal Antibody 种属 Pseudoalteromonas│aliena英文: L3MBTL3 Polyclonal Antibody应用领域极端微生物/耐冷菌
POP4 Polyclonal Antibody 种属 Pseudoalteromonas│elyakovii英文: POP4 Polyclonal Antibody应用领域极端微生物/耐冷菌
SART3 Polyclonal Antibody 种属 Rhodococcus│corynebacterioides英文: SART3 Polyclonal Antibody 模式菌株no
PROK2 Polyclonal Antibody 种属 Nitratireductor│sp.英文: PROK2 Polyclonal Antibody应用领域极端微生物/耐盐菌（盐度7%）
NCS1 Polyclonal Antibody 种属 Psychroflexus│sp.英文: NCS1 Polyclonal Antibody应用领域极端微生物/耐盐菌（盐度7%）
CLASP1 Polyclonal Antibody 种属 Jannaschia│seosinensis英文: CLASP1 Polyclonal Antibody应用领域极端微生物/耐盐菌（盐度7%）
POLB Polyclonal Antibody 种属 Enterovibrio│sp.英文: POLB Polyclonal Antibody应用领域共生微生物/鱼类共生菌/肠道微生态研究
ARFGAP1 Polyclonal Antibody 种属 Halomonas│cerina英文: ARFGAP1 Polyclonal Antibody应用领域极端微生物/高盐菌（盐度20%-26%）
HNRNPR Polyclonal Antibody 种属 Roseovarius│sp.英文: HNRNPR Polyclonal Antibody应用领域极端微生物/耐盐菌
ATP5A1 Polyclonal Antibody 种属 Marinobacter│guineae英文: ATP5A1 Polyclonal Antibody应用领域近海细菌
GNRH1 Polyclonal Antibody 种属 Staphylococcus│cohnii英文: GNRH1 Polyclonal Antibody应用领域近海细菌
ING3 Polyclonal Antibody 种属 Brachybacterium│sp.英文: ING3 Polyclonal Antibody应用领域近海细菌
GART Polyclonal Antibody 种属 Micrococcus│antarcticus英文: GART Polyclonal Antibody应用领域近海细菌
PRDM5 Polyclonal Antibody 种属 Vibrio│nereis英文: PRDM5 Polyclonal Antibody应用领域近海细菌
ACTA2 Polyclonal Antibody 种属 Winogradskyella│sp.英文: ACTA2 Polyclonal Antibody应用领域近海细菌
Marker Ⅱ DNA Ladder人二级淋巴组织趋化因子elisa检测试剂盒
英文名称:Human CCL21 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:30 pg/ml
检测目标:CCL21/6Ckine
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验例一 gongyulai ：我用的是药物诱导癌细胞凋亡，做DNA Ladder（用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取试剂盒）。跑出来的电泳不是一条条带，而是每条很长的拖尾现象，Marker到是出来了。我是按说明书上0。8%的琼脂糖。我用的是60v电压。不知道什么原因？郁闷。说明书上说混合温和是什么意思，我又没用力摇。我还想问收集凋亡细胞时离心时转速多少比较好？chujun_hust ：（1）“跑出来的电泳不是一条条带，而是每条很长的拖尾现象”： 可能是由于你点样时，时间太长了，导致样品扩散
4度离心，然后弃上清，将两管收集在一起，用PBS洗一次，然后就开始进行细胞裂解了!我不知道wscoco78是怎么做的，我也想知道更好的收集凋亡细胞的方法阿! 我今天进行了DNA LADDER的电泳(方法是按照细胞实验指南上面做的，参考了wscoco78的宝贵建议)，效果不错!发现这个方法真的不错，省力! 图像说明：两边的孔是加了lamda DNA marker的，第二、三孔(从左边数起)分别是两种细胞的对照组(即未任何处理过的细胞)，其它的是用顺铂处理细胞的不同浓度和不同
1、Marker选择标准（1）应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker，这样对目标片段大小的估计较准确。（2）所选marker应能清楚反映目标片段的大小，且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时，目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来，若二者不能兼顾，将前者作为主要考虑要素。2、常见问题分析Q：为什么marker条带非常模糊，无法辨别具体条带？A：出现上述情况，可能有以下几个原因：1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染；2. 电泳
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