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- 2025年12月14日
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- 文献和实验
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- 库存：
47
- 英文名：
50bpDNALadder
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
上海谷研
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
支
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
50bp DNA Ladder在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
产品名称：50bp DNA Ladder
英文名称:50bpDNALadder
储存条件:-20℃，有效期1年
单位:支
说明：核酸电泳marker概述：50bpDNALadder是由单独制备的PCR产物混合而成，共有8条DNA片段，已加入上样缓冲液，可以直接电泳，每次上样5μl。为便于电泳后观察，特异性加强250bp条带，其浓度约为100ng/5μl，其它条带的DNA浓度约为50ng/5μl。参考片段(bp)：50、100、150、200、250、300、400、500储存：-20℃可保存一年以上，4℃可保存2-3个月
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
NCAPH Polyclonal Antibody 种属 Candida│sake英文: NCAPH Polyclonal Antibody 模式菌株no
BLOC1S6 Polyclonal Antibody 种属 Pichia│onychis英文: BLOC1S6 Polyclonal Antibody 模式菌株no
SOS1 Polyclonal Antibody 种属 Candida│zeylanoides英文: SOS1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
BDH2 Polyclonal Antibody 种属 Candida│inconspicua英文: BDH2 Polyclonal Antibody 模式菌株no
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GNAS Polyclonal Antibody 种属 Hanseniaspora│uvarum英文: GNAS Polyclonal Antibody 模式菌株no
OXCT1 Polyclonal Antibody 种属 Pichia│sp.英文: OXCT1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
H2AFX(Phospho-Ser139) Monoclonal Antibody 种属 Candida│viswanathii宿主: Mouse 模式菌株no
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HSD17B10 Polyclonal Antibody 种属 Bacillus│beringensis英文: HSD17B10 Polyclonal Antibody应用领域未检测到果胶酶、酪蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、琼脂酶，检测到过氧化氢酶
SLC12A1 Polyclonal Antibody 种属 Psychrobacter│piscatorii英文: SLC12A1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
CHMP2B Polyclonal Antibody 种属 Demequina│sp.英文: CHMP2B Polyclonal Antibody应用领域产酶微生物/产淀粉酶、过氧化氢酶；未检测到果胶酶、酪蛋白酶、纤维素酶、琼脂酶
C1QA Polyclonal Antibody 种属 Croceicoccus│marinus英文: C1QA Polyclonal Antibody应用领域未检测到果胶酶、酪蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、琼脂酶，检测到过氧化氢酶
KLK7 Polyclonal Antibody 种属 Mameliella│alba英文: KLK7 Polyclonal Antibody应用领域产酶微生物/产过氧化氢酶；未检测到琼胶酶、蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活性
NUDT21 Polyclonal Antibody 种属 Flavobacterium│mizutaii英文: NUDT21 Polyclonal Antibody应用领域大洋细菌
HSD11B2 Polyclonal Antibody 种属 Oceanobacillus│iheyensis英文: HSD11B2 Polyclonal Antibody 模式菌株no
50bp DNA Ladder人趋化因子配体1elisa检测试剂盒
英文名称:Human I-309 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:7 pg/ml
检测目标:I-309/CCL1
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验例一 gongyulai ：我用的是药物诱导癌细胞凋亡，做DNA Ladder（用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取试剂盒）。跑出来的电泳不是一条条带，而是每条很长的拖尾现象，Marker到是出来了。我是按说明书上0。8%的琼脂糖。我用的是60v电压。不知道什么原因？郁闷。说明书上说混合温和是什么意思，我又没用力摇。我还想问收集凋亡细胞时离心时转速多少比较好？chujun_hust ：（1）“跑出来的电泳不是一条条带，而是每条很长的拖尾现象”： 可能是由于你点样时，时间太长了，导致样品扩散
相关专题 DNA Ladder是细胞凋亡 时产生的一些DNA片段，经过特定内切酶的酶切作用后，在电泳凝胶上产生多条核酸片段的条带，由于电泳图性状成梯形，因此称为DNA Ladder。DNA Ladder的产生与细胞凋亡密切相关，因此也可以利用DNA Ladder来判断细胞凋亡的标准。 例一 gongyulai ：我用的是药物诱导癌细胞凋亡，做DNA Ladder(用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取
发生细胞凋亡时，内源性核酸酶被激活，染色体DNA链在核小体之间被切割，形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段，将这些DNA片段抽提出来进行电泳，可得到DNA梯状条带（DNA ladder）。 一、材料与试剂 凋亡细胞； 蛋白酶K（500μg/ml） 8mol/L 醋酸钾 白细胞裂解液：pH8.0，10mmol/L Tris-HCl，10mmol/L NaCl，10mmol/L EDTA，1% SDS。 氯仿 无水乙醇，70%乙醇； 2%琼脂
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