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- 2025年12月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
32
- 英文名：
"CoomassieBrilliantBlueStainingReagent(StainingSolutionandDestainingSolution)"
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
上海谷研
- 保存条件：
RT
- 规格：
瓶
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
产品名称：考马斯亮蓝染色套装（染色液+脱色液）
英文名称:"CoomassieBrilliantBlueStainingReagent(StainingSolutionandDestainingSolution)"
储存条件:RT，有效期1年
单位:瓶
产品简介：本考马斯亮蓝染色套装(CommassieBlueStainingKit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝G-250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。产品内容：考马斯亮蓝染色液100ml考马斯亮蓝脱色液500ml说明书1份使用方法：1，电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中(至少5倍胶体积)，确保染色液可以充分覆盖凝胶。2，将凝胶置于摇床上缓慢摇动，室温染色至少2小时，低丰度蛋白染色需4小时以上。3，染色结束后移除染色液，染色液通常可重复利用2-3次，但染色效果会略有影响。4，将凝胶浸泡于和染色液等量体积的脱色液中，摇床上脱色4-8小时，期间更换3-5次脱色液。注意事项：Ø染色时间4小时以上效果最佳。Ø脱色可根据目的蛋白丰度和脱色效果随时终止，或延长脱色时间。Ø脱色越彻底，检测的蛋白量越低，脱色24小时一般可以检测出0.1ug蛋白量。Ø脱色后，将凝胶保存在水中，拍照或扫描保存图像。或制成干胶保存。
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
考马斯亮蓝染色套装（染色液+脱色液）在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
以下是公司正在热销的产品：
OTC Polyclonal Antibody 种属 Fistulina│hepatica (Schaeff.) With.英文: OTC Polyclonal Antibody 模式菌株no
ACADVL Polyclonal Antibody 种属 Gymnopilus│spectabilis (Fr.) Sing.英文: ACADVL Polyclonal Antibody 模式菌株no
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ACADVL Polyclonal Antibody 种属 Colletotrichum│ampelinum Cavara英文: ACADVL Polyclonal Antibody 模式菌株no
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TRAP1 Polyclonal Antibody 种属 Lepista│personata (Fr.) Cooke英文: TRAP1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
ILK Polyclonal Antibody 种属 Russula│virescens (Schaeff.) Fr.宿主: Rabbit应用领域与栎、桦、栲、栗树形成外生菌根
CD84 Polyclonal Antibody 种属 Polyporus│fraxineus英文: CD84 Polyclonal Antibody 模式菌株no
荧光素Cy5.5标记链霉亲和素 种属 Colletotrichum│coccodes (Wallr.) S. Hughes英文: Streptavidin/Cy5.5 模式菌株no
LCN2 Polyclonal Antibody 种属 Colletotrichum│sp.英文: LCN2 Polyclonal Antibody 模式菌株no
荧光素PE-Cy5.5标记链霉亲和素 种属 Cytospora│sp.英文: Streptavidin/PE-Cy5.5 模式菌株no
考马斯亮蓝染色套装（染色液+脱色液）人凝血因子IXelisa检测试剂盒
英文名称:Human Coagulation Factor IX ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:50 pg/ml
检测目标:Coagulation Factor IX/FIX/F9
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验g ，加1mol/L HCl 48ml，加重蒸水80ml使其溶解，调pH6.7，定容至100ml， 4℃保存。5. TEMED（四乙基乙二胺）原液6.10%过硫酸铵（用重蒸水新鲜配制）7. pH8.3 Tris-甘氨酸电极缓冲液：称取Tris6.0g，甘氨酸28.8g，加蒸馏水约900ml，调pH8.3后，用蒸馏水定容至1000ml。置4℃保存，临用前稀释10倍。8. 考马斯亮蓝G250染色液：称100mg考马斯亮蓝G250，溶于200ml蒸馏水中，慢慢加入7.5ml 70%的过氯酸，最后补足水
ml，溴酚蓝0.5g，SDS l0g，溶于水，用HCI调PH至8.0，定容至500ml。( 11)脱色液 甲醇：乙酸：水＝5：1 ：5（体积比）( 12)染色液（0.25%考马斯亮蓝R250）1.00g考马斯亮蓝R250，用脱色液400ml溶解，过滤备用。( 13)低分子质量标准蛋白溶液，包括溶菌酶（MW=14400Da）大豆胰蛋白酶抑制剂（215000）、碳酸酐酶（310000）、卵白蛋白（450000）、牛血清白蛋白 (662000）、磷酸化酶B (925000）。用样品缓冲液配成2mg/ml
(脱色液I加入0．25％考马斯亮蓝R―250)的容器内，脱色摇床染色2h或过夜。②弃去染色液，将凝胶在脱色液I(乙醇：冰乙酸：水＝25：8：65)中继续在摇床上震荡脱色。为脱色完全，需数次更换脱色液I。③当凝胶上的斑点清晰、凝胶背景较浅时，倒去脱色液I，加入脱色液Ⅱ，凝胶置于脱色液Ⅱ(乙醇：冰乙酸：水＝10：15：175)中保存。 (2)快速银染的主要步骤：45％乙醇+5％乙酸固定60min，水洗每次45min，共2次。用0．02％Na2 S2 03 敏化l～2min，水洗每次1min
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