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- BH-DB6691
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- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
57
- 英文名：
Normal Sheep Serum
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
瓶
| 产品名称 | 封闭绵羊血清（原液） |
| 英文名称 | Normal Sheep Serum |
| 货号 | BH-DB6691 |
有效期 5年
英文名称 Normal Sheep Serum
储存条件 -20°C
单位 瓶
规格：10ml
保存：-20℃保存，有效期5年。
产品简介:
封闭血清适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点，另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点，阻断抗体与样品中的Fc受体结合，从而降低背景，减少假阳性。在选择封闭血清时，要注意封闭用血清中不能含有目标蛋白，且封闭血清来源不能与一抗来源相同，可用与二抗相同来源的封闭血清。
注意事项：
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
免疫球蛋白：
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操作步骤：
根据使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品： 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
温馨提示：
工作液与浓缩液选择的技巧，以及各自的优势。
1，工作液的优势：工作液操作方便，降低实验操作步骤，对于要求无菌的实验，降低染菌风险。
2，浓缩液的优势：浓缩液成本相对较低，实验范围更广，对于不要求无菌的实验，可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高，保存更加稳定。
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文献和实验ChamQTM/AceQ® QPCR Master Mix 5 ml 可供 20 μl 体系 500 次反应。 模板的上样量 若直接使用 cDNA 原液作为模板，建议使用体积不超过 qPCR 反应总体积的 1 / 10！ 当复孔之间重复性不佳时，可将模板做适当稀释后以大体积加入反应体系，可有效提高实验重复性。看小 V 做的实验，是不是重复性爆表啊～～～ 预变性时间 常见的 qPCR 试剂预变性时间从 30 sec - 15 min 不等。科学家们为了封闭常温下酶的活性，使 qPCR 产生
高，也有好多小点，不知是不是转膜没转好？ 4、我的一抗原液是用含2%蔗糖的PBS配的，是不是就应该用这种PBS稀释使用呢？ 5、用封闭液稀释抗体的话，抗体能重复利用多少次？担心封闭液中的蛋白容易污染抗体。 济南基美 1,没有问题 2，没有问题，重要的是你的终浓度，而不是母液浓度 3，湿式？可以稍微延长一下转膜时间，要保持低温，把槽子埋在冰里或放冷柜里 4，用封闭液就可以，加0.3%的叠氮钠 5，取决于抗体，抗体好的话至少
荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization,FISH）
缓冲液配制该溶液，使其浓度为10mg/mL,用0.5mmol/L的NaHCO3调pH值为8.0。取上述溶液1mL，加9mL甘油，混匀。PI/antifade溶液：PI与antifade原液按体积比1:9比例充分混匀，－20oC保存备用。8）DAPI/antifade溶液：用去离子水配制1mL/mg DAPI储存液，按体积比1:300，以antifade溶液稀释成工作液。9）封闭液I：体积分数5％BSA 3mL，20×SSC 1mL,ddH2O 1mL,Tween20 5µL混合。10）封闭液II：体积分数5％
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