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- 2025年07月13日
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- 详细信息
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- 库存：
45
- 英文名：
Trypsin Digestion solution,0.1%
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
-20℃，有效期1年
- 规格：
瓶
| 产品名称 | 胰蛋白酶消化液（0.1% 用于抗原修复） |
| 英文名称 | Trypsin Digestion solution,0.1% |
| 货号 | BH-DB6679 |
英文名称 Trypsin Digestion solution,0.1%
储存条件 -20℃，有效期1年
注意事项：
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
免疫球蛋白：
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操作步骤：
根据使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品： 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
温馨提示：
工作液与浓缩液选择的技巧，以及各自的优势。
1，工作液的优势：工作液操作方便，降低实验操作步骤，对于要求无菌的实验，降低染菌风险。
2，浓缩液的优势：浓缩液成本相对较低，实验范围更广，对于不要求无菌的实验，可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高，保存更加稳定。
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文献和实验溶液用于测定激活前的蛋白含量及酶活性。原溶液中加入5mg结晶胰 蛋白酶 ，轻轻搅拌均匀，25℃放置2～4h，或4℃放置12～16h，使胰 蛋白酶 原活化。每隔1h取样测定胰蛋白酶活性增长情况，直至酶激活速度变慢或停止增长。一般比活可达到3 500～4 000 BAEE单位/mg。留取2mL溶液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。激活酶溶液用2mol/L硫酸调pH至2.5～3.0，滤纸过滤，滤去硫酸钙沉淀，收集滤液，4℃保存备用。方法二称取冷冻猪胰脏100
、封片、镜检。 三、常用抗原修复方法 用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片：1、抗原热修复 可根据实验室的具体条件，选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液，如 TBS、PBS、重金属盐溶液等，但实验证明，以 0.01M 枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）效果最好。请选用我公司提供的 ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液（粉剂）配制，取该粉剂一包溶于1000ml 的蒸馏水中，混匀，其 pH 值在 6.0 ± 0.1，如因蒸馏水本身造成的 pH 值偏差，请自行调整
抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法，也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位，在进行抗原修复之前，可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而，这一步骤也需要进一步优化，包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时，通常将其分为两大类：蛋白酶诱导表位修复（PIER）和热诱导表位修复（HIER）。一旦优化，抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复（PIER） 在PIER方法中，蛋白酶K、胰蛋白酶和胃
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