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- 库存:
37
- 英文名:
1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
-20℃,有效期1年
- 规格:
瓶
产品参数:
| 产品名称 | 1M DTT溶液/二硫苏糖醇 |
| 英文名称 | 1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol |
| 货号 | BH-DB6551 |
别名 二硫苏糖醇;1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-2,3-丁二醇;
英文名称 1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol
分子式 C4H10O2S2
分子量 154.25
储存条件 -20℃,有效期1年
单位 瓶
DTT即DL-Dithiothreitol,中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25,纯度>99%。常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近,但DTT价格略高一些。是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。
注意事项:
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
操作步骤:
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
温馨提示:
工作液与浓缩液选择的技巧,以及各自的优势。
1,工作液的优势:工作液操作方便,降低实验操作步骤,对于要求无菌的实验,降低染菌风险。
2,浓缩液的优势:浓缩液成本相对较低,实验范围更广,对于不要求无菌的实验,可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高,保存更加稳定。
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文献和实验东华帝君 原料量占比教大70%以上,粘合剂HPC,8-10%,崩解剂羧甲淀粉钠和交联羧甲基纤维素钠,其他微晶。两种崩解剂内外加各种比例都尝试了,就0.1M盐酸不崩,其他介质中崩解剂任意常规比例都没问题。原料药在0.1M中溶解度极大。大家有什么建议。 philfly 最可能是HPC,你可以换个粘合剂,或者用量降很低试一试。如果换粘合剂或者用量降很低崩解没问题,那你就懂了 q729056300
癸基二甲基铵基丙烷硫酸盐(SB 3-10) ( m/V ) 、20 mmol/L 二硫苏糖醇(DTT ) 、5 mmol/L 磷化氢、0.5% 两性电解质 ( V/V) pH 4~6.5、0.25% 两性电解质(pharmalyte) ( V/V ) pH 3~10,以双蒸水配制。配制时可以稍微加热 (不高于 30°C,见注释 2 ) 以溶解尿素。配制好的溶液可以分装保存在 -80°C 下数月( 注释 3) 。 2.4 UKS 蛋白质溶解缓冲液 9.5 mol/L 尿素
用具,如防毒服,防毒口罩及防毒手套等。聚丙烯酰胺无毒,但由于可能含有未聚合的物质故仍应谨慎对待。 ● 二硫苏糖醇(DTT):很强的还原剂, 散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。当使用固体或高浓度储存液时, 戴手套和护目镜, 在通风橱中操作。 ● 过硫酸铵:对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命。操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。始终在通风橱里操作,操作完后彻底洗手。 ● 溴乙啡啶(EB):强致突变剂,有毒性。避免吸入粉末
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