单个PCR管含平盖，透明，1000个

【建议】本月讨论与整理专帖-T-A克隆，另开帖不加分！

法，在涂布有IPTG和X-Gal的筛选平板上，重组菌株为白色，未转入重组质粒的菌株为蓝色。 ◆ 可对小量提取的质粒DNA做限制性酶切，采用天为时代公司的质粒提取试剂盒，可快速提取多个样本，而且由于提取的质粒纯度高，不会有酶切切不开，影响实验的情况。 ◆ 也可直接用细菌菌落进行PCR反应，筛选存在目的片段的重组菌落。天为时代公司生产的一管便捷式PCR反应系统（MasterMix系列产品）特别适合这种方法。用灭菌的吸头挑取单个菌落到已加入MasterMix的PCR管中，加入特异引物，进行

流式细胞术样本制备技术

液单个核细胞样本制备 无菌抽取骨髓液 0.5 mL； 将骨髓液标本中滴入含 1000 U/mL 肝素抗凝剂的 1 mL PBS 液中； 加入 PBS 稀释液将样本稀释至 10 mL； 15 mL 的离心管内，先加入 5 mL 的淋巴细胞分离液； 用吸管吸取 5 mL 的稀释后的骨髓液缓慢沿管壁加入淋巴细胞分离液的液面上； 400 g 室温离心 20~30 min（根据骨髓样本量确定离心条件，建议先摸索一下条件以达到最好的分离效果）；离心后可见试管内骨髓液清晰的分为 4 层，上层为 PBS 稀释

抗体产生细胞的检测——溶血空斑实验

取绵羊细胞免疫的小鼠脾脏，制成脾细胞悬液，与一定量的指示细胞（绵羊细胞）和补体结合，注入自制的小室内，经37℃孵育后，单个散在的抗体形成释放抗体，抗体与周围的绵羊红细胞（抗原）结合，并在补体参与下，使绵羊细胞溶解，结果在抗体形成细胞周围形成肉眼可见的圆形透明溶血区——溶血空斑。计算溶血空斑数目，则可推算脾内存在的抗体产生细胞总数。 材料： 1. 20—22克健康小鼠 2. 解剖器械