cIEF Peptide pI Marker Kit（cI

Purification of Lin-, c-kit+, Sca-1+ bone marrow cells for Culture, Flow Cytometry, or Transplantaion

on ice for 30 min (all antibodies 1/100 v/v). 4.  Wash with 10 mL of PBS/FBS, spin and resuspend in PBS/FBS with 1 µg/mL of propidium iodide. Filter through 70 µm nylon mesh. 5. Select cells which are PI negative, c-kit positive, Sca-1 positive

除了分离细胞，磁珠的这些用法你了解吗？

。 同样基于 MACS Technology 的 μMACS SuperAmp 试剂盒利用偶联了 poly-A 尾的 50 nm 超顺磁微珠准确高效捕获 mRNA 的同时，柱内 cDNA 合成保证了无原材料流失，进一步提高了反应的灵敏度和 RNA 分析的精确度，1 到 104 个细胞的转录组分析都可实现。 上图分别为核酸提取（左图） 和 cDNA 合成（右图）的基本原理 极少量细胞的核酸提取及逆转录仅在 3 个小时内即可完成，并带来如下优势： ✦超高灵敏度，所需细胞数量可少至 1 个，所需

实验操作篇

注意胶回收试剂盒内的回收柱吸附最大容量 ，避免 DNA 上样量过大导致超出柱子承载能力； ⑤充分洗涤，避免杂质残留：杂质成分会抑制 DNA 洗脱； ⑥不同试剂盒对特定长度的 DNA 回收率不同，例如 QIAquick Gel Extraction Kit 可以可纯化得到 70 bp 至 10 kb 的 DNA，回收效率高达 95%；MinElute PCR Purification Kit 可以洗脱纯化 70bp-4kb 的 DNA 产物。 图为使用 MinElute PCR