藕节LAMP鉴定试剂盒

藕节LAMP鉴定试剂盒服务流程：
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）
2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品（引物、RNA和cDNA）

产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

藕节LAMP鉴定试剂盒PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。溴紫葡萄糖肉汤       进口、国产    用于低酸性罐头食品商业无菌检验    Bromcresol Purple Dextrose Broth    250
酸性肉汤     进口、国产    用于酸性罐头食品商业无菌检验    Acid Borth    250
麦芽浸膏汤       进口、国产    用于酸性罐头食品商业无菌检验    Malt Extract Broth    200
锰盐营养琼脂      进口、国产    用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验    Mn2+Nutrient Agar    250
卵黄琼脂基础       进口、国产    加入卵黄，用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养    Egg Yolk Agar Base    250
疱肉牛肉粒      进口、国产    加入疱肉基础，配成疱肉培养基    Dried Meat Particle    100
缓冲李氏菌增菌肉汤基础    进口、国产    用于李氏菌的增菌培养(MercK标准)    Buffered Listeria Enrichment Broth    250
缓冲李氏菌增菌肉汤基础添加剂    进口、国产    每支加入225ml缓冲李氏菌增菌肉汤基础中    Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement    1ml*5支
PALCAM 琼脂    进口、国产    用于单增李氏菌选择性分离    PALCAM Agar    250
PALCAM添加剂    进口、国产    添加到HB4188中，用于李氏菌的选择性分离培养    PALCAM Supplement    1mg/支*10
藕节LAMP鉴定试剂盒LPM琼脂    进口、国产    用于单增李氏菌选择性分离(加入七叶苷和柠檬酸铁铵)（FDA标准）    LPM Agar    250
Half –Fraser 培养基    进口、国产    用于李氏菌的增菌培养（MERCK标准）    Half-Fraser Medium    250
Half –Fraser 添加剂    进口、国产    添加到HB4190中，用于李氏菌的选择性增菌培养    Half-Fraser Supplement    5ml*2
改良缓冲蛋白胨水(MBP)    进口、国产    用于单增李氏菌前增菌培养    Modified Buffered Peptone Water    250
EB增菌液    进口、国产    用于单增李氏菌选择性增菌培养（SN标准）    EB Enrichment Broth    250
Fraser 培养基    进口、国产    用于李氏菌的增菌培养（MERCK标准）    Fraser Medium    250