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- BJ-P10421
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
详见说明书
- 英文名：
Pericarpium trichosanthis
- 供应商：
上海邦景
- 规格：
50次
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）
2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品（引物、RNA和cDNA）
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
瓜蒌皮LAMP鉴定试剂盒实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。C.L.E.D 培养基添加剂 进口、国产 每支加入100ml C.L.E.D 培养基中 C.L.E.D Medium Supplement 1ml*5支
GC琼脂 进口、国产 用于淋球菌的分离培养(OXOID方法) GC Agar 250
BLB培养基 进口、国产 用于双歧杆菌的分离培养 BLB Medium 250
PEA 琼脂 进口、国产 用于从含革兰氏阴性菌的标本中分离培养革兰氏阳性菌 PEA Agar 250g
艾格琼脂 进口、国产 用于生产过程中无菌监测(Acumedia方法) Eugonic Agar 250
NTM 培养基 进口、国产 用于淋球菌的分离培养(Quelab方法) NTM Medium 250
瓜蒌皮LAMP鉴定试剂盒TM培养基 进口、国产 用于淋球菌的分离培养(Quelab方法) Thayer Martin Agar 250
YNB 培养基 进口、国产 用于基因工程中酵母菌的发酵培养 YNB Medium 100
胰蛋白胨 进口、国产 培养基原材料，提供细菌生长氮源，含色氨酸 Tryptone 250
酪蛋白胨 进口、国产 干酪素胰酶水解而成，培养基原材料 Peptone from Casein 250
牛肉浸粉 进口、国产 培养基原材料，提供细菌生长所需的生长因子 Beef Extract Powder 250
酵母浸粉 进口、国产 培养基原材料，提供细菌生长所需的维生素B族 Yeast Extract Powder 250
细菌琼脂粉 进口、国产 培养基原材料，培养基凝固剂 Agar Bacteriological 250
植物（大豆）蛋白胨 进口、国产 培养基原材料，含碳水化合物，提供细菌生长氮源 Peptone from Soybean Meal 200
细菌蛋白胨 进口、国产 培养基原材料，提供细菌生长所需的生长因子 Peptone Bacteriological 250
月示胨 进口、国产 培养基原材料，为营养要求高的细菌生长提供营养 Proteose peptone 250
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文献和实验长度可达 20kb，适合于各种 GC 含量的扩增，可用于多种样本的直接 PCR 如植物叶片、全血等。且扩增仅需 30s/kb，甚至于 2kb/s。如此卓越，爱不释手了吧？ 4. 选择直接扩增试剂盒对粗品扩增 vazyme 生产的各种直扩试剂盒，直接对粗品进行扩增，大大减少了实验的工作周期。如小鼠基因型鉴定可以直接使用 One Step Mouse Genotyping Kit，全血扩增可以直接使用 Blood Direct PCR Kit V2。
组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注，短短几年，该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中，在这次甲型H1N1流感事件中，日本荣研化学公司接受WHO的邀请进行H1N1 LAMP试剂盒的研制。通过荣研公司近十年的推广，LAMP技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中，并得到了欧美国家的认同。LAMP方法的优势除了高特异性、高灵敏度外，操作十分简单，对仪器设备要求低，一台水浴锅或恒温箱就能实现反应，结果的检测也很简单，不需要像PCR
。 外泌体分离方法有很多种，包括超速离心、过滤离心、密度梯度离心、免疫磁珠和商用试剂盒。但是这么多方法中，我们通常推荐选用超速离心法进行提取和分离，因为超速离心方法得到的外泌体不管是从得率还是纯度上都比较好。其他方法的特点如下： 过滤离心：得率比较低 密度梯度离心：步骤繁琐，得率较低 免疫磁珠：特异性比较高，得率较低 商用试剂盒：价格高，效果一般 综合以上，超速离心法是目前价格适中、得率和纯度都能兼得的一种方法。 四、如何鉴定外泌
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