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- BJ-P10370
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
详见说明书
- 英文名：
Herba violae
- 供应商：
上海邦景
- 规格：
50次
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）
2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品（引物、RNA和cDNA）
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
紫花地丁探针法PCR鉴定试剂盒PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。ELISA Kit for Vitamin B9 (VB9) 维生素B9(VB9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 进口、国产 规格： 48T/96T
ELISA Kit for Osteonectin (ON) 骨粘连蛋白(ON)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 进口、国产 规格： 48T/96T
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紫花地丁探针法PCR鉴定试剂盒ELISA Kit for Osteonectin (ON) 骨粘连蛋白(ON)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 进口、国产 规格： 48T/96T
ELISA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1) 血小板反应蛋白(THBS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 进口、国产 规格： 48T/96T
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ELISA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1) 血小板反应蛋白(THBS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 进口、国产 规格： 48T/96T
ELISA Kit for Myoglobin (MYO) 肌红蛋白(MYO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 进口、国产 规格： 48T/96T
ELISA Kit for Prostaglandin H2 (PGH2) 前列腺素H2(PGH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 进口、国产 规格： 48T/96T
ELISA Kit for Glycoprotein IIb/IIIa (GPIIb/IIIa) 血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡbⅢa)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 进口、国产 规格： 48T/96T
ELISA Kit for Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI) 纤溶抑制因子(TAFI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 进口、国产 规格： 48T/96T
ELISA Kit for Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI) 纤溶抑制因子(TAFI)检
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文献和实验实时荧光定量 PCR 技术（Quantitative Real-time PCR，简称 qPCR）是在 PCR 扩增过程中，通过实时监测荧光信号的变化，达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断，动物疾病监测，食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延，qPCR 技术更是因其检测通量高，速度快，操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果，我们需要注意哪些方面呢？其实决定一次实验成功
高通量、低成本SNP、突变或甲基化检测方法—HRM 技术应用
细胞中1 个突变细胞，适用于手术和其它微量组织中突变检测。检测灵敏性远高于“PCR+ 测序”的25% ，即100 个正常细胞中至少有25 个突变细胞，测序仅适用手术组织。 • 特异性好：PCR 产物无需后续处理，特异性高达100% 。直接未知杂合突变鉴定准确性100%，特异性100% 。直接未知纯合突变鉴定准确性96%， 利用非标记探针快速基因分型法直接未知纯合子鉴定准确性100%。 • 重复性好：重复性100% • 使用范围广：不受碱基位点局限，除可检出已知突变外，也能检测出未知突变。
— real-time PCR，针对miRNA的real-time PCR与常规的real-time 有所不同。 目前有的公司提供的是探针法试剂，有的是SYBR Green法试剂，因探针法试剂成本较高，丁香通在此挑选出SYBR Green法的代表作 — QIAGEN公司的完整的一套miRNA定量试剂miScrip system来介绍，这次比起其他进口品牌同系列的产品，QIAGEN价格倒是不贵。 第一步是miRNA的提取，核酸提取无疑是QIAGEN公司的绝活，对于miRNA这样的小分
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