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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
DAPI solution(readytouse)
- 保质期:
有效期一年
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
-20℃避光保存
- 规格:
详见说明书
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
中文名称:DAPI溶液(即用型)
英文名称:DAPI solution(readytouse)
产品规格:10ml|50mL
发货周期:1~3天
本产品为DAPI水溶液,为即用型工作液,可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。
CAS号:28718903
分子式:C16H15N5·2HCl
分子量:350.25
纯度:≥90% (HPLC和 TLC)
储存条件:20℃避光,有效期一年。
DAPI(4’,6二脒基2苯基吲哚二盐盐)是一种能够与DNA中大部分A,T碱基相互结合的荧光染料﹐常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜﹐它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。
注意事项:
DAPI溶液(即用型)尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
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采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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文献和实验与所有的化学平衡一样,当溶液的浓度、温度等条件改变时,弱酸、弱碱的解离平衡会发生移动。就浓度的改变来说,除用稀释的方法外,还可在弱酸、弱碱溶液中加入具有相同离子的强电解质以改变某一离子的浓度,从而引起弱酸或弱碱解离平衡的移动。例如,往 HAc 溶液中加入 NaAc ,由于 Ac - 离子浓度增大,使平衡向生成 HAc 的一方移动,结果就降低了 HAc 的解离度。又如,往 NH 3 水溶液中加入 NH 4 Cl ,由于 弱酸溶液中加入该酸的共轭
化丙啶(propidium iodide,P1)高。 2.溶液配制(1)0.01mol/L PBS(pH7.0):取0.1mol/L NaH2 PO4 ・H2 O 34ml、0.1mol/LNa2 HPO4 66ml、NaCl 0.9g,溶于900m1双蒸水;(2)DAPI储存液:将0.5mgDAPI溶于5.0ml PBS中,分装,低温长期保存;(3)DAPI工作液:用PBS稀释DAPI储存液,终浓度为0.1ug/ml。 3.染色程序(1)培养的单层细胞(未固定)或新鲜组织的冰冻切片等,PBS漂洗5分钟
DAPI Staining To visualize DNA, incubate fixed samples with 100 ng/ml 4',6'-diamidino-2-phenylindole hydrochloride (DAPI) in PBS for 30 min. Rinse 3x with PBTw. Materials PBS: Sambrook et al. (Molecular Cloning ). PBTw
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