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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
45
- 保质期:
有效期一年
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
-20℃避光保存
- 规格:
详见说明书
JC10荧光探针(线粒体膜电位荧光探针)尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
中文名称:JC10荧光探针(线粒体膜电位荧光探针)
英文名称:
产品规格:1mg
发货周期:1~3天
线粒体膜电位荧光探针JC10是JC1的升级产品,同样可用于检测线粒体膜电位的变化。因JC1虽然在许多实验中被广泛应用,但是其水溶性很差,即使在1 μM浓度的条件下,JC1也会在水的缓冲液中析出。而JC10具有更好的水溶性,可以在某些需要高浓度染料的实验中替代JC1。
正常细胞内,JC10选择性聚集在线粒体基质中形成可逆的红色荧光聚合物(Ex=540 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC10由多聚体转变为单体形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=490 nm, Em=525nm)。JC10不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。这两种颜色的变化可以用流式细胞仪上的标准滤光器检测到,绿色荧光可用FL1通道分析,红色荧光可用FL2通道分析。除了用于流式细胞术,也可以用于荧光成像和荧光酶标板检测平台。
在一些细胞系中JC10有着比JC1更好的表现。不过,JC10的性能表现极具细胞依赖性特征。
注意事项
1)JC10是光敏感性的,所有染色步骤的操作过程中避免强光接触。
2)JC10染色完成后,立即进行后续的结果分析非常必要;
3)了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:20℃干燥避光,有效期一年。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
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文献和实验一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体膜电位崩溃,细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可产生红色荧光;凋亡早期,线粒体膜电位降低,JC-1不能聚集在线粒体基质中,此时JC-1为单体
染料的浓度,引起假去极化。荧光探针JC-1是一种阳离子型的亲脂性染料,能够自由穿过细胞膜,随细胞膜电位的变化而在膜两侧保持动态平衡。其特点是线粒体膜电位低时浓度低,主要以单体形式存在,488nm激发时最大发射波长为527nm,呈绿色荧光,胞浆相对线粒体为低电位,形成流式图中所有细胞FL1均为阳性;膜电位高时浓度高形成聚集体,488nm激发时的最大发射波长为590nm,红色荧光。活细胞线粒体膜电位高,线粒体内JC-1聚集体的浓度高,红色荧光很强,在流式图上表现为FL1和FL2双阳性,而凋亡细胞则大多
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