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- 2025年10月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 英文名：
Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells
- 保质期：
有效期一年
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20℃避光保存
- 规格：
详见说明书
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
中文名称：细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒
英文名称：Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells
产品规格：1000T
发货周期：1～3天
本试剂盒为动物细胞死活检测提供了双色荧光染色方法。本试剂盒采用两种广泛常用的荧光探针，通过检测细胞内酯酶活性和质膜完整性两个方面反映细胞活力。本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光多孔板、扫描仪、流式细胞仪以及其他荧光检测系统。本试剂盒可以应用于大多数的真核哺乳动物细胞，包括贴壁细胞核某些组织，但不适用与细菌、酵母。该方法更快捷安全且灵敏度更高。
原理：在钙黄素AM 存在活细胞内时，其特点就是由于胞内无所不在的酯酶活性作用，由几乎无荧光、具有细胞膜透性的钙黄素AM生成具有强烈荧光信号的绿色荧光物质（Ex/Em：495nm/520nm）。而对于受损的细胞膜来说，碘化丙啶(PI)可以传过进入细胞，与核酸结合，荧光信号从而放大40 倍，产生一个明亮的红色荧光信号的死细胞（Ex/Em：530nm/620nm）。
注意事项：
细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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文献和实验一、材料 1. Resazurin细胞活力检测试剂盒（Biotium，Inc.30025） 2. 细胞：在本试验中，使用了三种人类前列腺癌细胞系进行检测。 （1）DU145（ATCC，HTB-81）（2）PC3（ATCC，CRL-1435）（3）LNCap（ATCC，CRL-1740）二、仪器 1. SpectraPLUS酶标仪三、步骤 1. 标准曲线制备： （1）在96孔板中加入100 μL 培养基，然后接种适量细胞，贴壁细胞控制在40~10 000/孔
光显微镜观察，激光滤片为QB24，压制滤片为TB8，经显微镜观察，发绿色荧光。绿色荧光的是有活力的，而发红色荧光的是无活力的死细胞。4、统计活力。活力以有活力的细胞数占总观察细胞数的百分数表示。 细胞活力（%）=观察到的活细胞数／观察的总细胞数x100(二)染色法1、制备原生质体和细胞材料。2、配制0.005~0.001%的染料。如伊文思蓝、洋红、甲基蓝等。3、用染料处理数分钟，染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色。4、染色过的细胞材料，放在显微镜下观察。凡未染或染色及浅的细胞是有活力
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
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