雪腐镰刀菌PCR试剂盒产品图

雪腐镰刀菌PCR试剂盒

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  • ¥1490
  • 信裕生物
  • XY-1418P
  • 国产/进口
  • 2025年07月15日
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    • 详细信息
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    • 库存:

      20

    • 英文名:

      Fusarium nivale

    • 保质期:

      一年

    • 供应商:

      上海信裕生物科技有限公司

    • 保存条件:

      -20℃

    雪腐镰刀菌PCR试剂盒
    Fusarium nivale. PCR Kit
    产品及特点 
    本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。
    Taq:扩增效率最高的耐热 DNA 聚合酶,其扩增速度约为 1-2kb/min。扩增碱基出错率为 10-5 左右。其产物未端带有 A,可直接用于 TA 克隆。
    Pfu:目前保真度最高的耐热 DNA 聚合酶,碱基出错率为 10-6,但扩增效率低于 Taq 酶, 一般能很好的扩增 2kb 以下的片段。其扩增速度约为 500bp/min 左右。其产物为平未端,须加 A后才可用于 TA 克隆。
    Taq Plus:Taq 和 Pfu 的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比 Pfu 高, 保真度比 Taq 好。其扩增速度约为 1000bp/min 左右。其产物未端带有 A,可直接用于 TA 克 隆。 含染料 PCR MasterMix 反应完后可以直接电泳检测。不含染料的 PCR MasterMix 反应完后 加入上样缓冲液后电泳检测。

     
    产品细节图片1
     
    产品名称 方法 规格 价格
    雪腐镰刀菌LAMP试剂盒 LAMP 50次 2490元
    雪腐镰刀菌PCR试剂盒 PCR 50次 1490元
    雪腐镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒 染料法 50次 2490元
    雪腐镰刀菌探针法荧光定量PCR试剂盒 探针法 50次 3490元
    它具有下列特点:
    1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
    2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增雪腐镰刀菌,与其他微生物没有交叉反应。
    3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
    4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
    5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
    规格及成分
    成分 编号 十孔盒包装
    PCR MagicMix 3.0 试剂一 1 mL(红盖)
    超纯水 试剂二 1 mL(亮黄色)
    雪腐镰刀菌PCR引物混合液 试剂三 100 μL(白盖)
    雪腐镰刀菌PCR 阳性对照
    (1×10E8 拷贝/μL)
    试剂四 50 μL(黄盖)
    核酸释放剂(试用装) 试剂五 20 次(1 mL,绿盖)
    使用手册 试剂六 1 份
    运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
    自备试剂:样品 DNA。
    使用方法:
     一、样品 DNA 的制备
    1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装,其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂。
    2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 补骨脂 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
    二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
    3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
    成分 N+2 个样品管 PCR 阴性对照 PCR 阳性对照
    PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
    雪腐镰刀菌PCR引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL
    N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL -- --
    PCR 阴性对照(水) -- 18 μL --
    PCR 阳性对照(雪腐镰刀菌PCR阳性对照的 1000
    倍稀释液)
    -- -- 18 μL
    1. 按下表设置 PCR 反应:
    过程 温度 时间
    预变性 95℃ 5 min
    PCR 反应(35 个循环) 95℃ 15 sec
    57℃ 15 sec
    72℃ 40 sec
    最后延伸 72℃ 10 min
    三、电泳检测
    5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

    雪腐镰刀菌PCR试剂盒常见问题与解决方法:
    常见问题 可能原因 解决方法


    阳性对照、待测样本均无条带。
    PCR反应体系或反应条件不合适。 使用梯度PCR摸索PCR反应条件。
    PCR试剂保存不当失去活性。 2× PCR Mix应保存于-20℃,使用时避免反复冻融。若使用频繁,可在4℃短时间存放。
    引物设计问题。 尝试重新设计引物进行检查。






    阳性对照有目的条带,待测样本无条带或条带弱。
    不当储存或长期储存引起试剂活性丧失。 使用新鲜的试剂。
    加入组织裂解液过量。 增大反应体系,或减少裂解液的用量。
    样本裂解混合液保存不当或保存时间过久,DNA基因组已经降解。 裂解混合液液可在4℃保存2-3天,尽量使用新制备的裂解液混合液进行PCR。
    模板加入量不适合。 在反应体系10-20%范围内优化模板加入量。反应效性能较差时,可以降模板浓度调节到低于10%的范围。
    PCR循环数不足。 适当增加PCR的循环数,推荐在35-40循环为佳。因为模板复杂,一般PCR反应要比用纯化的 DNA模板多5-10个循环为佳。



    非特异性扩增
    PCR退火温度太低,循环数、引物浓度或模板浓度太高。 增加PCR退火温度,降低PCR循环数、引物浓度或模板浓度。
    PCR引物错配。 重新设计PCR引物。
    配制PCR反应体系时温度太高或配制完成后放置时间太久。 PCR反应体系的配制在低温下进行,配制完成后尽快进行PCR扩增反应。



    阴性对照出现目的条带
    操作工具或试剂污染。 实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。
    样本间交叉污染。 每个取样器只对一个样本使用;或取完一个样本后,将取样器刃口浸入2%的次中,反复涮洗,然后用干净的纸巾擦干残液。

    特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
     

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