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天津本生生物
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【产品货号】95128095【产品说明】Reservoir 25 ml divided, disposable 【产品简介】一次性25ml分离储液槽【品牌】Thermo
注:产品仅用于科研实验,不用于临床!
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文献和实验人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血,用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释,上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中,先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液(1.077 g/mL),再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液,血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注:Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温,温度过高会导致分离不明显,温度过低会导致密度过大,同样分离效果不好, 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移
与硅胶模框交界的缝隙内加入已融化的1%琼脂(糖)。其目的是封住空隙,凝固后的琼脂(糖)中应避免有气泡。 2.配胶 ① 分离胶 20ml pH8.9 7.0 %PAA溶液中,凝胶缓冲液(pH8.9)2.5ml,分离胶贮液5.0ml,重蒸馏水2.5ml,充分混匀,抽气10min,最后加AP 10 ml。 ② 浓缩胶 pH6.7 25% PAA:浓缩胶缓冲液∶浓缩胶贮液∶40%蔗糖溶液∶核黄素溶液按1∶2∶4∶1的比例混合。 3.制备凝胶板 不连
【实验操作步骤】 1 使用移液管(枪)吸取15ml淋巴细胞分离液注到50ml分离管下室(15ml分离管吸取4ml); 注意:请用移液管直接将淋巴细胞分离液通过隔板小孔注到分离管下室,勿将分离液置于分离管上室,否则分离液难以流至下室,影响后续分离操作。 2在50ml分离管中加入2-30ml稀释血液样品(15ml分离管倒入0.5-8ml); 注意: 1)请勿将稀释血液样品注入到隔板下室; 2)请将稀释血液从隔板上方缓缓加入,所加入的位置勿距离隔板太远,否则容易在管壁上残留血液样本。
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