SDS-PAGE彩色预混胶（10%分离胶）

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）（图）

，混匀； ddH2O            3.0 ml　　1.0 mol/LTris-HCl pH=8.8         2.1 ml　　30% Acr-Bis            2.8 ml　　10% SDS                 80 ul　　10%AP                    56 ul　　TEMED                   6 ul 4 向玻璃板间灌制分离胶，立即覆一层重蒸水，大约20min后胶即可聚合； 5 按如下体积配制6%浓缩

干货：小分子量蛋白（11KD）WB实验艰辛历程及经验总结

泳吧。4、在我用SDS-PAGE胶进行电泳过程中，一直以来都是按照说明书配制压缩胶和分离胶的，并且在说明书中，以配置2块胶为例，分离胶说明书中是让配置10ml，压缩胶是3ml。我一直以为是对应关系，在这次大悟之后我发现分离和压缩完全不是一对一对应关系，人家只是给了你配置这么多体积胶的配方而已，虽然在一个纵列上，但是绝不是对应关系（我确实才觉悟，高手轻鄙视哈）。5、接上一条经验，所以我在配胶过程中，下层分离胶配制了10ml，但是实际上每块玻板里面只加了大概3.5ml吧，也就是整个玻板高度的60-70%的样子。然后压缩

垂直电泳槽的使用

实验材料 •BSA（1 mg/ml），0.05 g的BSA(Sigma-Aldrich Ltd.)溶于50ml ddH2O中，每Eppendorf管约加入1ml溶液，并在-20℃下冷冻。 •预染色marker (Bio-Rad) •ProMarker(Wealtec) •两套玻璃板与校正卡，厚玻璃板与U形玻璃板，0.75 mm厚胶条和一个0.75 mm 10齿梳（Wealtec） •浓度为12％的SDS-PAGE分离胶（0.75 mm）;2.31 ml ddH