试剂盒组份: 5×Equilibration Buffer————750μl FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl Recombinant TdT Enzyme—————20 μl Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl DNase I (1 U/μl)———————5μl 10×DNase I Buffer——————100 μl 产品具有以下优点: 1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异 2、规范包被操作----吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高 3、先进的优化方案----重复性高,可靠性强 4、购买本公司的Synaptophysin/SY mRNA原位杂交试剂盒免费代测 5、技术服务要求:专业,规范,高效 6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本 7、可检测动物类型丰富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等 8、可检测指标齐全:炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等 9、经济、实惠、可靠,完善、稳定的实验体系,优秀的科研队伍,先进的实验设备、准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴。 下列产品是公司正在热销的产品: HC琼脂基础250g用于化妆品中霉菌总数测定 营养肉汤(NB) 250(g) incubation media 营养肉汤(NB) 250(g) LB Lennox琼脂 LB Lennox Agar 250克 BR 卫矛醇半固体琼脂培养基,用于细菌卫予醇发酵试验(SN标准)incubationmedia卫矛醇半固体琼脂培养基,用于细菌卫予醇发酵试验(SN标准) 改良MSRV培养基 250g 用于沙门氏的分离培养(MERCK方法) IL1RAP Others Human 人 IL1R3 人细胞裂解液 (阳性对照) 直肠癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml PDE9A Others Human 人 PDE9A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) FRhK-4细胞,恒河猴胚肾细胞 人胚胎胰腺组织来源细胞,CCC-HPE-2细胞 CM-M064小鼠前列腺上皮细胞完全培养基100mL 大鼠癌细胞;MADB106 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414) N-Acetyl-DL-methionine 1115-47-5 质量规格:0.99 DL-Homocysteine 454-29-5 质量规格:0.95 m-Fluoro-DL-tyrosine 403-90-7 质量规格:0.99 Calpain Inhibitor I(ALLN) 110044-82-1 质量规格:≥95%,美国进口 DL-Ala-DL-Ala 2867-20-1 质量规格:0.97 DL-Alanyl-DL-norvaline 2325-18-0 质量规格:0.99 3-(1-Naphthyl)-L-alanine 55516-54-6 质量规格:>98%,BR Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanine 138774-94-4 质量规格:0.98 L-Citrulline 372-75-8 质量规格:>99%,BR Fmoc-L-Citrulline 133174-15-9 质量规格:>98%,BR Boc-L-β-homoalanine 158851-30-0 质量规格:>98%,BR Boc-L-ß-homoaspartic acid 5-benzyl ester 254101-10-5 质量规格:0.98 Fmoc-β-homoaspartic acid 209252-17-5 质量规格:>98%,BR Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester 203854-49-3 质量规格:0.98 H-HomoArg-OH 156-86-5 质量规格:98%,BR,L型 Synaptophysin/SY mRNA原位杂交试剂盒英文名称:Rhodopseudomonas pseudopalustris,假性沼泽红假单胞菌 菌种又名:Rhodopseudomonas rutila 中文名称:假性沼泽红假单胞菌 菌种代号:NBRC 100419; DSM 123; NCIMB 8252 分离:地表水或泥浆 来源历史:<< NBRC << NCIMB << S.R. Elsden << C.B. van Niel, ATH 2.1.6 培养基: 584 PYM Medium Polypepton* 10 g Distilled water 1 L Agar (if needed) 15 g Yeast extract 2 g MgSO4·7H2O 1 g pH 7.0 (*Prepared medium is available from Wako Pure Chemical Ind., Ltd., Osaka, Japan.) 903 RHODOSPIRILLACEAE MEDIUM (modified) Na2-succinate 1.00 g (NH4)-acetate 0.50 g Fe(III) citrate solution (0.1% in H2O) 5.00 mL KH2PO4 0.50 g MgSO4 · 7 H2O 0.40 g NaCl 0.40 g NH4Cl 0.40 g CaCl2 · 2 H2O 0.05 g Vitamin B12 solution (10 mg in 100 mL H2O) 0.40 mL Trace element solution SL-6 (see below) 1.00 mL Resazurin (0.1%) 0.50 mL Distilled water 1000 mL Yeast extract 0.30 g L-Cysteiniumchloride 0.30 g Adjust pH to 6.8. Boil the medium for a few minute. Bubble the medium with nitrogen gas and fill 10 ml in 15 ml tubes with a rubber septum under a stream of nitrogen gas. Autoclave at 121°C for 15 min. Sterile syringes are used to inoculate and remove samples. Incubate in the light using a tungsten lamp. Trace element solution SL-6 ZnSO4·7 H2O 0.10 g MnCl2·4 H2O 0.03 g H3BO3 0.30 g CoCl2· 6 H2O 0.20 g CuCl2 ·2 H2O 0.01 g NiCl2· 6 H2O 0.02 g Na2MoO4·2 H2O 0.03 g Distilled water 1000 mL 培养条件:30°C 7天 菌种说明:1.菌株復活:冷凍管立即置於37℃恆溫水槽回溶,回溶菌液必須全部吸取至 10 mL 的新鮮培養基中進行活化培養。冷凍管菌液不要重複冷凍解凍。 2.特殊培養條件:厭氧和光照。 3.增殖培養的接種量需求:接種菌液的體積必須佔新鮮培養基的 20% 至 50%。 生物安全等级:1 操作程序: 注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。 1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。 2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。 3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。 4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。 5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。 6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。 7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。 8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。 9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。 10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗 11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。 12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。 13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。 14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。 15.必要时苏木素复染,充分水洗。 16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。