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35
- 英文名:
Anti-MMP9 Polyclonal Antibody
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详见说明书
- 供应商:
上海博湖
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详见说明书
- 规格:
详见说明书
产品名称 Anti-MMP9 Polyclonal Antibody
英文名称: Anti-MMP9 Polyclonal Antibody
宿主: Rabbit
别名: GELB;CLG4B;MANDP2;MMP-9
| 产品名称 | 辣根过氧化物酶标记的小鼠抗羊IgG |
| 英文名称 | Anti-MMP9 Polyclonal Antibody |
| 货号 | BH-DB1340 |
稀释比例: IHC 1:50-200.
交叉反应:Human
蛋白分子量: 78kDa
Gene ID: 4318
保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
储存液: Buffer: PBS with 0.03% Proclin300, 50% glycerol, pH7.3.
纯化方法: Affinity purification
亚型: IgG
免疫原: A synthetic peptide of human MMP9
性状: 液体
Public Immunogen Range: A synthetic peptide of human MMP9
Swiss Prot: P14780
Subcellular Locations: Secreted extracellular matrix extracellular space
克隆类型:Polyclonal Antibody
操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL~1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
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小鼠肾实质细胞完全培养基 100mL镨标准溶液(1000μg/ml)质量规格:1000μg/mlPraseodymium standard
P19小鼠畸胎瘤细胞 P19 mouse teratoma cells a-MEM(肌醇 43.2mg/l,叶酸 8.82mg/l)+7
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HNE2-LMP1细胞,人鼻咽癌细胞系 小鼠肝癌细胞,Hepa 1-6细胞 CM-H079人心脏微血管内皮细胞完全培养基100mL甲基4-羟基-3-甲氧基肉桂酸酯Methyl 4-hydroxy-3-methoxycinnamate质量规格:美国进口
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P
非洲绿猴肾细胞系/IgR;VERO/IgR没食子酸Gallic acid质量规格:>98%,BR
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兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Adefovir dipivoxil 中文名:阿德福韦酯 分子式:C20H32N5O8P
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兔子血小板衍生生长因子elisa试剂盒 兔子血小板衍生生长因子试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子血小板衍生生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔子血小板衍生生长因子试剂盒、兔子血小板衍生生长因子eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Adefovir 中文名:阿德福韦 分子式:C8H12N5O4P 度:98.0%
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辣根过氧化物酶标记的小鼠抗羊IgGPemetrexed 中文名:培美曲塞二钠 分子式:C20H21N5O6 度:98.0% 小鼠白介素2(IL-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester 中文名: 分子式:C16H16N4O3 度:98.0% 小鼠白介素4(IL-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Pemetrexed disodium 中文名:培美曲塞二钠 分子式:C21H23N5Na2O6 度:98.0% 小鼠17-类固醇(17-KS)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Ethyl 5-amino-4-cyano-3-(2-ethoxy-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxylate 中文名: 分子式:C12H14N2O4S 度:98.0% 小鼠17羟孕(17-OHP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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固定液的应用:
1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1.单纯固定液
(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效
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文献和实验1. 8 mg 辣根过氧化物酶放入1 ml玻璃瓶,加入1 ml双蒸水溶解,液体呈棕色。 2. 放入一个磁力搅拌子,电磁搅拌同时逐滴缓缓加入新配制的 NaIO4 0.2 ml,室温下继续搅拌40 min,液体呈现草绿色。 3. 将全部溶液用滴管装入反复用去离子水冲洗的透析袋中,4 oC 对1 mM pH 4.4的NaAc透析过夜,中间换液3-4次,每次300 ml,溶液最终呈浅棕色。 4.
辣根过氧化物酶标记凝聚素的组织化学染色程序 1.组织切片脱蜡处理等同前; 2.流水冲洗5分钟,3%H2 O2 孵育10分钟(阻断内源性过氧化物酶,避免假阳性); 3.PBS漂洗3次,每次5分钟; 4.1%牛血清白蛋白孵育,室温20分钟,移去多余液体; 5.加入PBS稀释的辣根过氧化物酶―凝集素,置湿盒内孵育。室温1.5小时; 6.PBS漂洗3次.每次5分钟; 7.呈色 DAB
素与生物素高度特异性结合的关系来放大免疫组化信号,但此方法有产生内源性生物素背景的可能性。而酶标聚合物法,利用聚合物与二抗结合,形成聚合物-二抗复合物,实现信号放大,该方法不受内源性生物素的干扰。 表 2 免疫组化多种检测系统分类 图 2 酶标聚合物法检测系统 图 3 链霉亲和素-生物素法检测系统 在显色法中,针对 HRP(辣根过氧化物酶)显色系统,其常用底物为DAB/AEC(HRP/DAB 呈棕褐色染色,具有很好的光稳定性,HRP/AEC 呈红色染色,在阳光下会褪色,不易保存。 基础 IHC
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