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- 详细信息
- 文献和实验
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41
- 英文名:
Canine Adiponectin Elisa Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
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详见说明书
- 规格:
瓶
| 产品名称 | Canine Adiponectin Elisa Kit价格 |
| 英文名称 | Canine Adiponectin Elisa Kit |
| 货号 | YS-D4217 |
中文名称:犬脂联素Elisa试剂盒
英文名称:Canine Adiponectin Elisa Kit
英文别名:30 kDa adipocyte complement-related protein; ACRP30; ADIPO; Adipocyte C1q and collagen domain-containing protein; adipocyte complement related protein; Adipocyte complement-related 30 kDa protein; adipocyte, C1Q and collagen domain containing; Adipocyte, C1q and collagen domain-containing protein; Adipocyte-specific protein AdipoQ; Adiponectin; Adipose most abundant gene transcrip
反应性:Canine
样品类型:血清/血浆/细胞培养上清
检测范围:47-3000 pg/ml
灵敏度:9 pg/ml
使用方法:
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项:
1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
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licanming 请问有无人用过assaydesigns公司的PKC Kinase Activity Assay Kit(cat NO:EKS-420A)?可否说一下应用的经验?注意事项等?还有,该试剂盒的说明书有几处地方不是很懂,请大家帮忙看一下: 1、To avoid cross contamination, change disposable pipette tips between the addition of each standard
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