- ¥225
- 信裕生物
- XY0642
- 中国
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
T4 DNA ligase（T4连接酶）
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存。
- 规格：
40000U
注意事项：
对于普通的转化大肠杆菌的操作，不必对连接产物进行纯化，连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时，通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚氯仿抽提方法等纯化DNA，然后再进行电转。
由于平末端连接体系中，T4 ligase用量较大，若要提高电转实验效率，推荐65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟以灭活T4 DNA Ligase后，用DNA产物纯化试剂盒或氯仿抽提对连接后的DNA片段进行纯化后才能进行电击转化。T4 DNA Ligase可以进行平端连接，但效率较低。
普通连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察，推荐先在65℃孵育10分钟使
T4 DNA Ligase失活，以避免T4 DNA Ligase和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
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文献和实验1X反应缓冲液成分: 50mMTris-HCl 10mMMgCl2 1mMATP 10mMDithiothreitol pH7.5@25°C 酶活定义: Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtogive50%ligationofHindIIIfragmentsofλDNA(5′
目前市场上常见的TA克隆试剂盒，根据连接方法可以分成两种：方法1：以T4连接酶进行连接的方法，这两种方法转化子比较多，阳性率也不错，唯一的不足就是连接的时间长。因为连接时间越长效率越高，一般快速连接方法需要半个小时到一个小时；达到最佳的效果，要过夜连接。方法2：以拓扑异构酶（TOPO）进行连接的方法，这种方法的优势是快速连接，在5-15分钟就可以将目的基因克隆到载体中，阳性率比较高，这种方法国内也有人模仿。这种方法虽然速度快，但是也有一些缺陷，比如长片段连接效率不如T4连接酶，转化子少
相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
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