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- 上海研生
- YS-D3226
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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
34
- 英文名：
Protein standard solution (5mg/ml BSA)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
瓶
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
产品名称：BSA标准品5mg/ml规格
别名:牛血清白蛋白
英文名称:Protein standard solution (5mg/ml BSA)
储存条件:-20℃，有效期:1年
单位:ml
BSA标准品是一种高质量的校准品，广泛用于总蛋白测定实验中来建立标准曲线和校准控制。BSA普遍认可为总蛋白定量的校准蛋白，此标准品可用作BCA，Bradford或其他蛋白测定实验中的蛋白浓度校准标准液。标准曲线的建立和校准对照用。
牛血清白蛋白，英文名称:为Bovine Serum Albumin，也称Bovine albumin，或Cohn Fraction V，简称BSA。BSA有着极其广泛的实验室应用:，在免疫实验中常用作封闭剂，包括ELISA、WB（Western Blot）。作为载体蛋白，将其交联于半抗原和其他弱抗原可以使它们在抗体中具有更强的免疫原性。在限制性内切酶消化反应中，BSA常常被用作一些酶的反应稳定剂，并且能防止它粘附到管壁和枪头上。BSA也常用于生物制药的过程或者作为营养物用于细胞和微生物培养。除此之外，还作为蛋白定量检测的标准品使用。我们提供的BSA产品，使用优质牛血浆，利用热休克法（Heat Shock）法制备而成。
参数规格：
| 产品名称 | BSA标准品5mg/ml规格 |
| 英文名称 | Protein standard solution (5mg/ml BSA) |
| 货号 | YS-D3226 |
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
下列是BSA标准品5mg/ml规格的相关产品：
黄芪总皂苷（） 质量UV≥98%， Astragaloside
松萝酸英文名称Usinic acid规格:20mg/支
宇佐曲变种 Aspergillus usamii var.HFF1(人成纤维细胞)
穗花牡荆甙英文名称Agnuside规格:20mg/支
黄芩苷(） 质量HPLC≥98%， Baicalin
穗花杉双黄英文名称Amentoflavone规格:20mg/支
BSA标准品5mg/ml规格1957301410X Buffer KpnI1 ml猪脂联素受体1(ADIPOR1)人血管紧张素转化酶(ACE)ELISA Kit，48T/96T
2609179210X Buffer TaqI1 ml猪脂联素受体2(ADIPOR2)兔环磷酸腺苷(cAMP)ELISA Kit，48T/96T
12619210X Buffer AarI, AjiI, Bpu10I, ScaI, PasI1 ml猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)大鼠环磷酸腺苷(cAMP)ELISA Kit，48T/96T
47407710X Buffer Ecl136II, PacI, SacI1 ml猪肿瘤坏死因子α(TNFα)小鼠环磷酸腺苷(cAMP)ELISA Kit，48T/96T
181871910X Buffer Eam1105I1 ml猪主要急性期蛋白(MAP)人环磷酸腺苷(cAMP)ELISA Kit，48T/96T
19121585 10X Buffer SdaI1 ml猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ)大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA Kit，48T/96T
2031151710X Buffer SduI, Ppu21I1 ml猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ)小鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA Kit，48T/96T
电泳级，PH7.09.099%25mlIL1人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA Kit，48T/96T
电泳级，PH6.09.099%12mlCD30大鼠活化素A(Activin-A)ELISA Kit，48T/96T
电泳级，PH6.08.099%25mlLTD4小鼠活化素A(Activin-A)ELISA Kit，48T/96T
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文献和实验Maxisorb 442404）Micro test tubes, 大头针或喷火枪药品试剂：（a） Buffer A-0（b） BSA标准品 （Bio-Rad, bovine serum albumin, 100 μg/mL）（c） 未知浓度样本 （unknown BSA, 0.8 mL, 由教师调配发给）（d） Dye Reagent （Bio-Rad 500-0006） 先以水稀释四倍备用。 以染料Coomassie brilliant blue G-250 配制的溶液，勿与胶体电泳染色用的CBR-250
大体积螯合物。因此减少蛋白质样品和BCA工作缓冲液的稀释比例应当保持反应的动力学并且保证标准曲线的工作范围能够覆盖到低蛋白浓度。 表1.蛋白标准品和BCA工作缓冲液体积比为20:1时，其中BSA标准品和BCA工作缓冲液的有效成分的浓度和摩尔量的比。 推荐的是1:1体积混合的BCA工作缓冲液和蛋白质样品，这里我们使用10ul蛋白质样品和10ulBCA工作液进行混合反应。大大减少蛋白质样品的稀释比例，并且也改变了BCA分析方法的动态范围，将检测浓度降低到0.01mg/ml. 我们修改了实验
Bromodeoxyuridine Staining of Mammary Tissue
Triton X-100 100mL PBS 40 mL DAB Solution DAB Stock - 3'-3' diaminobenzadine, 2.5 mg/mL in 0.1M PO4, pH7.6. Unactivated DAB - 1 mL DAB + 19 mL 0.1M PO4 +450 mL 1% aq. NiCl2, pH7.6. Activated DAB - 10 mL unactivated DAB + 23 mL 30% H2O2.
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