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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
22
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
-20℃
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
参数规格：
| 产品名称 | 细菌蛋白提取试剂盒规格 |
| 英文名称 | 详见说明书 |
| 货号 | YS-D3214 |
储存条件:-20℃，避光，有效期:至少1年
细菌蛋白提取试剂盒用于大肠杆菌提取可溶性蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶的研究。细菌蛋白提取试剂盒仅用于科研。
操作方法:
1、细菌可溶性蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的蛋白酶抑制剂和PMSF；混匀，放置在冰上备用；
将菌体湿重称重，然后按照比例（1g：10ml）加入的新配置的裂解液，混匀，过程注意冰上操作；
将混匀液移入超声仪中，超声；
超声条件：总时间45min，超声时间3s，间隔时间3s，过程为冰浴环境；
超声结束，w4度离心，10000r/min20min；
吸取上清至新的管中；
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)
使用方法：
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
下列是细菌蛋白提取试剂盒规格的相关产品：
环氧泽泻() 质量HPLC≥98%， Alismoxide
C1orf33腺样癌特异性相关抗原EMC1抗体
人参皂苷Rg1英文名称Ginsenoside-Rg1规格:20mg/支
PhosphoCEBP alpha (Thr222 + Thr226)蛋白磷酸酶2C抗体
人参皂苷Rg2英文名称Ginsenoside-Rg2规格:20mg/支
细菌蛋白提取试剂盒规格可溶性CD146分子CLIA Kit for CUB Domain Containing Protein 1 (CDCP1)
DNAJA1突触融合蛋白1抗体CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 7 (IGFBP7)
HSPABP/HIP/HSC70 Interacting Protein HIP突触泡蛋白2A抗体CLIA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP)
FKBP52磺酰脲类药物受体1抗体CLIA Kit for Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS1)
HAS3磷酸化Smad2抗体CLIA Kit for Angiotensinogen (AGT)
HAPLN2S腺苷L同型半胱氨酸水解酶抗体CLIA Kit for Angiotensinogen (AGT)
HABP2可溶性血管内皮生长因子受体2抗体CLIA Kit for Mucin 5 Subtype AC (MUC5AC)
Hemoglobin Beta剪接因子，精氨酸/丝氨酸丰富19CLIA Kit for Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF)
BR，分子量1万98%10gTIM3CLIA Kit for Neuropilin 1 (NRP1)
BR，分子量1万98%100gCD3，CD4，CD8CLIA Kit for Thrombomodulin (TM)
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 新鲜血液样品（ 200 μl ）2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物样品（10-20 mg），研钵，液氮2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南（DP419） ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头（200 μl ，1ml），1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 涡旋振荡器，台式低温离心机实验准备-试剂盒准备：第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
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