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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
猪胚胎睾丸传代细胞
- 细胞类型:
贴壁生长
- 肿瘤类型:
贴壁生长
- 供应商:
上海莼试
- 库存:
45
- 英文名:
ST
- 生长状态:
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- 年限:
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- 运输方式:
免费包邮
- 器官来源:
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- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
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- 免疫类型:
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- 物种来源:
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- 相关疾病:
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- 组织来源:
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- 规格:
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| 产品名称 | 猪胚胎睾丸传代细胞规格 |
| 类型 | 贴壁生长 |
| 编号 | CS-X4426 |
种属:ST
形态:上皮细胞样
培养方法
培养基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
生长特性:贴壁生长
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
TNFRSF18/GITR 糖皮质激素诱导坏死因子受体抗体 规格 0.2ml
Anti-GRM5/FITC 荧光素标记代谢型谷氨受体5抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD44/PE 荧光素PE标记CD44抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-ICOS-L/B7-H2/CD275/FITC 荧光素标记诱导协同刺激分子配体CD275抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CD59 CD59抗体 规格 0.2ml
Mtp53(Mutant type p53) 突变型P53抗原 0.5mg
ING1 英文名称: 生长抑制因子基因1抗体 0.1ml
猪胚胎睾丸传代细胞规格 UTS2R/GPCR GPR14 G蛋白偶联受体14抗体 规格 0.1ml
Anti-Phospho-EGFR(Tyr1173) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷化表皮生长因子受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Beta-Amyloid 1-40(CT)/FITC 荧光素标记β淀粉样肽(1-40)C端抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-FLAG Tag (CT)/FITC 荧光素标记FLAG Tag标签抗体(C端)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CXCL13/BCA1 B-淋巴细胞趋化因子抗体 规格 0.1ml
SHBG 性激素结合球蛋白多肽 0.5mg
katanin p80 英文名称: 剑蛋白p80抗体 0.2ml
注意事项:
猪胚胎睾丸传代细胞规格实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作;每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面;
操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作;无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作;
小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。操作过程中,应避免引起aerosol之产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。
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文献和实验干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养 不可以采用下面的protocol,需要用专用的protocol和培养基。 一般培养 维持ES细胞处于未分化状态 ES细胞培养 用含有LIF(白血病抑制因子)和Feed细胞的培养基(高糖)来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1%明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2-3天从达到80%-90%融合的平板按1:8的比率传代细胞一次,细胞传代以后,在将细胞接种在0.1%明胶包被的培养皿之前,通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织
)来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1%明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2-3天从达到80%-90%融合的平板按1:8的比率传代细胞一次,细胞传代以后,在将细胞接种在0.1%明胶包被的培养皿之前,通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时,使分化细胞粘附,从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃,5%CO2,100%湿度条件下培养。如果在Feed细胞,那么就需要采用MMC进行处理,抑制Feed细胞增殖,但仍然能保持其分泌LIF因子的活*。下文中暂不提及Feed细胞。Feed
病抑制因子)的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1%明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2-3天从达到 80%-90%融合的平板按1:8的比率传代细胞一次,细胞传代以后,在将细胞接种在0.1%明胶包被的培养皿之前,通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时,使分化细胞粘附,从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃,5%CO2,100%湿度条件下培养。培养基ES:配制一20×不含DMEM,HS,ESGRO的溶液(该溶液也能用于EB培养基--见下文)。分装在50ml FALCON管中
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