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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
Rhizopus microspous
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
50T
荧光定量PCR是在PCR体系中加入荧光化合物(荧光染料或荧光探针)。利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,使每个循环变得“可见”。本产品就是以探针法荧光定量 RT-PCR 技术为基础开发的专门检测荧光定量PCR试剂盒。
| 产品名称 | 小孢子酒曲菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 |
| 英文名称 | Rhizopus microspous |
| 货号 | XGR7142 |
1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据鲍疱疹样病毒高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。
荧光化学物质:
小孢子酒曲菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的*技术平台。
2. SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合,因此可以通过溶解曲线,确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近,不会产生荧光。PCR产物生成后,退火过程中,分子信标中间部分与特定DNA序列配对,荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
荧光定量PCR服务:
简介:实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求:
(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。
(02)请提供已知的全长基因序列。
(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
(01)引物(探针)设计与合成。
(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。
(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。
(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准:
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。
以下是公司正在热销的产品:
羊仰口线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 Bunostomum trigonocephalum
洋葱伯克氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒直销 Burkholderia cepacia
痒螨通用探针法荧光定量PCR试剂盒 Psoroptes spp.
恙虫病东方体探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 Orientia tsutsugamushi
耶尔森菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 Yersinia spp.
细胞凋亡抑制因子BCL-2 英文名称: Cell appoptosis inhibitory BCL-2 规格: 48T/96T 英文缩写: BCL-2
脑源性神经营养因子 英文名称: Brain-derived Neuroophin factor 规格: 48T/96T 英文缩写: BDNF
骨成型蛋白-2 英文名称: Bone morphogenetic protein-2 规格: 48T/96T 英文缩写: BMP-2
骨成型蛋白-4 英文名称: Bone morphogenetic protein-4 规格: 48T/96T 英文缩写: BMP-4
微量可调移液器P50 支 BioHit原装
Histaminedixy7nochloride组胺双盐酸盐1克BR,99%
聚四拂 Polytqtrcfluoroqthylqnq;Tqtrcfluoroqthqnq hoMopolyMqr; Tqtrcfluoroqthylqnq polyMqr; 900840
乙酸铵/乙酸铔/铵/Ammonium acetate AR,98% 500克 国产/进口
纺锤菌素二盐酸/纺锤菌素/Netropsin dihydrochloride 超,98% 25毫克 国产/进口
维生素K3shēng huà shì jì容量:1克
二甲基 97%DImetxYLPHOSPHINIC ACID
3Bromonepxtxelene1carboxylic acid 6662
6吲哚 6Fluoroindole,≥98.0 % 39 1G 通用试剂
8羟基铜盐500克
小孢子酒曲菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书CBZL酸1克2~8℃
26D异山梨醇Isosorbide
2(4bromobenzyl)thiopxene 10257
Ethyl diazoacetate,≥98% 6 5G 通用试剂
录化铜(Ⅱ),二水合 Nc
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文献和实验:(各位大侠: 小弟最近做克隆实验遇到很大的障碍,已经连续三次失败了。请各位大哥帮助分析原因,小弟不胜感激! 我克隆的是一个肿瘤标志物的基因片段,长约150bp 。具体过程如下: 一, 普通PCR,电泳,切下特异条带; 二, 用QiaGene公司胶回收试剂盒提取特异条带DNA,所得胶回收产物约30ul。取2ul做荧光定量PCR(该方法条件优化已完成),证实胶回收产物中目的片段含量很高。 三, 用上海生工的PUCm-T载体试剂盒完成连接反应。按说明书操作,反应过夜。 四,
进行扩增杂交,操作按试剂盒说明书进行;采用空肠弯曲菌、解尿支原体作为对照菌进行荧光定量PCR。 【注意事项】 1. 配制和使用硝酸银溶液时要格外小心,不要滴洒在地上,桌上及手上等处,氧化为黑色的液点极难去除。 2. 荧光定量PCR操作时要戴口罩及一次性手套,并尽可能在低温下操作。 思 考 题 简述荧光定量PCR的基本原理。 (曲 萍)
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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