相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 英文名:
RIPA buffer(high)
- 保质期:
有效期1年
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
-20℃,裂解液4℃
- 规格:
瓶
| 产品名称 | 高效RIPA裂解液(组织/细胞)说明书 |
| 英文名称 | RIPA buffer(high) |
| 货号 | YS-D3210 |
别名 蛋白提取试剂盒
英文名称 RIPA buffer(high)
储存条件 附件PMSF-20℃,裂解液4℃。有效期1年
外观(性状) 黄色澄清液体
单位 瓶
本品为高效组织细胞裂解液。主要用于从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。组织活细胞本产品配有一支PMSF(0.3ml/1.5ml),PMSF请于-20℃保存。
使用说明
如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
根据使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。混匀备用 (PMSF现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项 :
本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量 SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
使用方法:
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项:
1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
下列是高效RIPA裂解液(组织/细胞)说明书的相关产品:
IL-16 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
IL13RA1 / CD213a1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
IL10RB / CRFB4 抗體, 鼠單抗 ELISA WB IHC-P IP 50 µg
IL-16 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB IHC-P IP 50 µg
IL10RB / CRFB4 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IF ICC/IF 50 µg
IL10RB / CRFB4 抗體, 兔多抗 ELISA 50 µg
IL-16 抗體, 兔單抗 WB 50 µg
IL-16 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
IL10RB / IL-10RB 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 FCM 25 Test
IL13RA1 / IL-13RA1 抗體 (APC), 兔單抗 ELISA 400 µg
TIMP-1 / TIMP1 抗體, 鼠單抗 FCM 25 Test
CD40 / TNFRSF5 抗體, 鼠單抗 FCM IF ICC/IF 50 µg
CD40 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
CD40 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM 25 Test
CD40 / TNFRSF5 / Bp50 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
CD40 / TNFRSF5 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
CD40 / TNFRSF5 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM 25 Test
CD40 / TNFRSF5 抗體, 鼠單抗 FCM IF ICC/IF 50 µg
CD40 / TNFRSF5 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
CD40 / TNFRSF5 / Bp50 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
CD40 / TNFRSF5 / Bp50 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB 50 µg
CD40 / TNFRSF5 / Bp50 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
ASGPR1 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
ASGPR1 / ASGR1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IHC-P IP 50 µg
CXCL10 / Crg-2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
KLK3 / Kallikrein 3 抗體, 鼠單抗 IHC-P 50 µg
KLK3 / Kallikrein 3 抗體, 鼠單抗 IHC-P 50 µg
KLK3 / Kallikrein 3 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
Amyloid beta A4 蛋白 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
Ancylostoma duodenale十二指肠钩口线虫LAMP试剂盒
Anisakis spp.异尖线虫属LAMP试剂盒
Aphanomyces astaci变形丝囊霉菌LAMP试剂盒
Aphanomyces invadans侵入性丝囊霉菌流行性(溃疡综合症病原)LAMP试剂盒
Arachnia propionica秘杆菌LAMP试剂盒
Arcanobacterium haemolyticum溶血隐秘杆菌LAMP试剂盒
Arcobacter spp.弓形杆菌属通用LAMP试剂盒
Arthrinium spp.节菱孢霉属通用LAMP试剂盒
Arthrobacter equi马节杆菌LAMP试剂盒
Arthrobacter spp.节杆菌通用LAMP试剂盒
Ascosphaera apis蜜蜂球囊菌LAMP试剂盒
Aspergillus flavus黄曲霉LAMP试剂盒
Aspergillus fumigatus烟曲霉LAMP试剂盒
Aspergillus nidulans构巢曲霉LAMP试剂盒
Aspergillus ochraceus赭曲霉LAMP试剂盒
Aspergillus parasiticus寄生曲霉LAMP试剂盒
Aspergillus spp. 曲霉属通用LAMP试剂盒
Astrovirus(AV)星状病毒RT-LAMP试剂盒
Aujeszky's Disease Virus(ADV)奥叶兹基氏病病毒LAMP试剂盒
Avian Adenovirus禽腺病毒LAMP试剂盒
高效RIPA裂解液(组织/细胞)说明书Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽脑脊髓炎病毒RT-LAMP试剂盒
Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒RT-LAMP试剂盒
Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽疱疹病毒1型LAMP试剂盒
Avian Herpesvirus 2(Gallid Herpesvirus-2、GaHV-2)禽疱疹病毒2型LAMP试剂盒
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验/ml 牛胰蛋白酶抑制剂 ( aprotinin ),1μg/ml亮抑蛋白酶肽 ( leupeptin )裂解液缓冲液:10mM Tris-HCl(pH7.4),0.15M NaCl,5mM EDTA(pH8.0),1%Triton×100;使用前加5mM DTT,0.1mM PMSF异丙醇和5mM ε-氨基己酸。2. 裂解液的制备A. 制备细胞裂解液:①收集胰蛋白酶消化的细胞并离心,用PBS清洗。②用100μl RIPA缓冲液冰浴溶解沉淀10min(每500000个细胞20μl RIPA缓冲
血液/组织/细胞基因组DNA提取试剂盒操作指南(DP304)——动物组织
以下操作按照天根产品 DP304 血液/组织/细胞基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 大鼠肝脏10-30 mg 研磨器2. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管3. PBS溶液,无水乙醇4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文
冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS , PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8 ℃的温度。加入一定量的 PBS ( PH7.4 ),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









