- ￥460
- 普利莱
- 北京
- E2017
- 2025年12月25日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
//
- 库存：
大量
- 供应商：
北京普利莱基因技术有限公司
- CAS号：
//
- 规格：
100次
描述：组织细胞总抗氧化能力检测试剂盒（Cu2+法），即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with Copper Ion Method是一种灵敏简单的检测总抗氧化能力（Total Antioxidant Capacity，TAOC）的试剂盒。
原理：Cu2+法测定TAOC的原理是利用样品中抗氧化物还原Cu2+为Cu+，Cu+与反应体系中Cu2+螯合剂螯合，通过570nm吸光度可以测定Cu+产生量，从而测定样品TAOC。利用具有强抗氧化能力的Trolox为标准品，可以计算样品以Trolox为参照的TAOC。
本试剂盒方便快捷，加入待测样品30分钟即可进行吸光度测定。
组成：（1）Cu+螯合剂溶液 25 ml/瓶 （2）Cu2+溶液 0.5 ml/管
（3）10 mM Trolox标准品溶液 0.5ml /管 （4）组织细胞裂解液 100ml
储存条件：-20℃储存，一年有效。
所需设备：酶标仪 最佳波长570nm
适用范围：测定各类动物培养细胞、组织等。
操作步骤：
1. 样品的准备
1.1 细胞样品的准备：收集新鲜细胞(如果是贴壁细胞，请用细胞刮刮下，不宜使用胰酶和EDTA消化)，PBS洗涤细胞一次，离心收集细胞，吸尽上清。加入200μl预冷的组织细胞裂解液，超声破碎细胞释放其中的抗氧化物。4℃，10000g离心10分钟。取上清用于总抗氧化能力的测定。不立即测定的样品可以-70℃保存。如果样品中总抗氧化能力超出测定范围，可利用组织细胞裂解液适当稀释后测定，稀释倍数请通过预实验确定。
1.2 组织样品的准备：取20mg组织，加入400μl的预冷的组织细胞裂解液，用匀浆器冰浴匀浆。4℃，10000g离心10分钟。取上清用于总抗氧化能力的测定。不立即测定的样品可以-70℃保存。如果样品中总抗氧化能力超出测定范围，可利用组织细胞裂解液适当稀释后测定，稀释倍数请通过预实验确定。
2. 试剂盒的准备
总抗氧化能力检测工作液的配制：按下表比例取Cu+螯合剂溶液和Cu2+溶液配制总抗氧化能力检测工作液。
| 1个样品 | 10个样品 | 50个样品 | |
| Cu+螯合剂溶液 | 200 μl | 2 ml | 10 ml |
| Cu2+溶液 | 4 μl | 40μl | 200 μl |
利用PBS将10mM的Trolox溶液稀释成1、0.5、0.25、0.125、0.062、0.031 mM浓度的Trolox溶液，用于标准曲线测定。每次测定新鲜配制系列标准品稀释液。
4. 测定方法
4.1参考下表，使用96孔板，依次加入总抗氧化能力检测工作液、样品或标准品后，混匀，室温孵育30分钟。
| 空白对照 | 标准曲线 | 样品 | |
| 总抗氧化能力检测工作液 | 200 μl | 200 μl | 200 μl |
| 标准品 | ─ | 10 μl | ─ |
| 样品 | ─ | ─ | 10 μl |
| PBS | 10 μl | ─ | ─ |
| 室温孵育 | 30 min | 30 min |
|
5. 数据处理
利用标准品浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标制作Trolox抗氧化能力标准曲线，并获得横纵坐标之间的函数关系式，然后利用标曲和各样品的吸光度值计算样品的总抗氧化能力，对于细胞和组织样品，可以根据样品中蛋白浓度测定，计算每毫克蛋白中总抗氧化能力。Trolox抗氧化能力标曲如下图所示：
参考文献:
1. Valko, M. et al., 2006. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease. Int. J. Biochem. Cell.Bio., 39(1): 44-84.
2. Sies, H., 1997. Oxidative stress: oxidants and antioxidants. Exp. Physiol., 82(2): 291-295.
注意事项:
1. 本试剂盒检测涉及氧化还原反应，很多氧化剂和还原剂都会干扰试剂盒的测定，特别是巯基乙醇、DTT等含有巯基的试剂会严重干扰本试剂盒的测定，请尽量避免。
2.每次测定同时利用标准品制作标准曲线。
3. 初次使用试剂盒时，粉末试剂和小体积液体试剂请适当离心后使用。
4. 本产品仅限专业人员用于科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
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文献和实验Oxford Biomedical Research的氧化应激及慢性炎症生物标志物检测
醛酸结合，个体间葡萄糖醛酸化的范围很大，为28-80%。因此，尿液样品要用β-葡糖醛酸酶预处理，使研究者区分个体间葡萄糖醛酸化的差异并检测总系统异前列烷。 样品用葡糖醛酸酶处理对尿样中F2-异前列烷浓度检测的影响。6个人尿样混合后，分2部分。一部分掺入10 ng/ml合成的15-F2t-异前列烷。样品用或不用葡糖醛酸酶预处理得到的数据。 三、更多氧化应激研究用产品： 1. 总抗氧化能力检测试剂盒，货号TA02，96孔板：赛默飞世尔的一份应用
28~31 ] 、抗小麦叶镑病 （ Paccinia iri( icina ) 等试验 [32]。有报道 [33]，在转基因燕麦种子中表达大麦硫素蛋白（hordothionin ) ，获得对镰刀菌的抗性。除了这些特异性基因的研究外，还有报道通过优化启动子，以调控基因在需要的植物器官中的表达（表 20.3和表 20.4)。例如，大麦 Lem2 基因启动子，调控基因在禾谷类作物幼穗特定发育时期和特定组织细胞中表达，尤其是在外稃和外果皮中表达 [34]。 4.3.2 病毒
or mass spectrometry.图示：S-亚硝基化 Weste Blot 试剂盒标记和检测 S-亚硝基化的反应。样品首先与 MMTS 反应，封闭 S-亚硝基化蛋白质中的游离巯基。然后用抗坏血酸盐选择性还原 snitroscysteine，并用 Thermo Scientific iodotmt zero 标记试剂进行标记。随后，使用提供的抗 TMT 抗体在免疫印迹中检测 TMT 标记蛋白。5、Methylation：一碳甲基转移至氮或氧（分别为 N-和 O-甲基化）至氨基酸侧链，增加了蛋白质的疏水
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