- ￥720
- 普利莱
- 北京
- E1011
- 2026年01月06日
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- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
//
- 库存：
大量
- 供应商：
北京普利莱基因技术有限公司
- 规格：
105次
原理：根据Trinder反应原理1,2，葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOD)作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢(H2O2)；然后用过氧化物酶(POD)催化过氧化氢，使色原物质(4-氨基安替比林)生成醌亚胺，颜色的深浅与葡萄糖浓度成正比。
适用范围：适用于动物实体组织、培养细胞中葡萄糖含量的测定。
组成 (105次微量检测)：
-
- ml葡萄糖标准品10 mmol/L (等于180 mg/100 ml)；
以上组分4 ºC保存6个月有效。
所需设备：721、722型可见光分光光度计、酶标仪、生化分析仪。最佳工作波长550-555nm，如仪器无此波长建议优先选用570、530、490nm。
操作步骤：
- 组织细胞裂解：1、动物细胞：离心收集细胞后，通常情况下，可按比例每1x106 个细胞加入0.05-0.1ml裂解液，震荡裂解后室温静置10分钟。2、实体组织：离心管精确称重，加入组织块后再称重，二者相减(即减量称重法)计算组织重量(约50mg)。建议按每1mg组织加入5-10µl裂解液，用玻璃匀浆器或者电动匀浆器匀浆破碎组织，匀浆后室温静置10分钟。
- 裂解液处理：取适量上清液转移到1.5ml离心管中，余下的裂解液可用BCA法蛋白定量试剂盒(P1511)进行蛋白定量或－20ºC储存。
- 工作溶液配制：按4:1比例，取8 ml试剂R1与2 ml试剂R2混合得到10 ml 工作溶液。当天使用或4ºC保存1周。
- 标准品稀释：10 mM葡萄糖标准品用蒸馏水或与样本缓冲液一致的液体稀释为2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625µM。注意设置0浓度对照反应管。由于葡萄糖测定反应的线性关系甚好且范围很宽，通常设置黑体标记的4管即可，一般不需要设置大于2~10mM的标准管，以此得到的标准曲线用来测定大于2 mM葡萄糖浓度通常不会失真。世界卫生组织(WHO)推荐也可仅设置单一浓度的标准管。注意：不能使用用户自己简单配制的葡萄糖标准溶液。
- 葡萄糖含量测定：
- 参见下表加样。先加标准品或待测样品，后加工作溶液。可依据葡萄糖浓度高低微量调整样品与工作液体积比例。超出线性范围可适当稀释。
- 37ºC 反应20min (15~30min)或25ºC室温反应30 min但灵敏度略降。反应平衡后颜色在60 min内稳定。
- 先用蒸馏水+工作液空白管调零，然后测定各管OD5值。
- 绘制标准曲线并计算葡萄糖浓度。
- 如果仅用单一标准管：葡萄糖浓度(mmol/L) = 标准品浓度 × (样品管OD－空白管OD) / (标准管OD－空白管OD)。
（可微量调整样品与工作液体积比例）
| 96孔微板测试（反应体积200μl） | 比色杯测试（反应体积800 μl） | ||||||
| 空白管 | 标准管 | 样品管 | 空白管 | 标准管 | 样品管 | ||
| 蒸馏水μl | 5 | 蒸馏水μl | 20 | ||||
| 标准品μl | 5 | 标准品μl | 20 | ||||
| 标品 μl | 5 | 标品 μl | 20 | ||||
| 工作溶液μl | 195 | 195 | 195 | 工作溶液μl | 780 | 780 | 780 |
- 人空腹血糖参考值3.89-6.11 mmol/L (70-110 mg/dl)，低血糖症临界水平2.7-3.89 mmol/L，高血糖症临界水平6.11-7.22 mmol/L。不同单位之间的换算公式：1 mmol/L = 0.0555 mg/100 ml (dl)；1 mmol/L × 18 = 1 mg/100 ml (dl)。
- 检测线性范围0.02~20 mmol/L。浓度超过20 mmol/L用蒸馏水或生理盐水稀释1-2倍后测量。批内变异系数为0.7~2.0%，批间变异系数为~2%。准确度与精密度可达到临床检测要求。
- 《全国临床检验操作规程》指明测定血糖用草酸钾抗凝：每5ml血液加0.2 ml 6%草酸钾；其优点是抑制糖酵解和分解，测得的葡萄糖浓度更接近真实；缺点是干扰其它生化检查项目。枸椽酸钠抗凝剂易引起溶血，也干扰许多生化检查项目。如必须用同一份标本做全套生化检测，可采用肝素钠抗凝剂。
- 血样应在在30分钟内完成测定。血清或血浆仍含大量血细胞，室温下糖酵解旺盛可消耗葡萄糖使测量值降低。室温放置1小时葡萄糖含量开始降低，3小时后明显下降。4 ºC保存血样葡萄糖稳定性明显增加。使用血浆测定葡萄糖浓度可能更接近真实浓度。相比之下用血清标本测得的葡萄糖浓度偏低，且随着样品放置时间延长而明显下降。
- Trinder, P. (1969). Annals of Clin. Biochem. 6: 24 – 27.
- Barham D and Trinder P. (1972). Analyst 97: 142 – 145.
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文献和实验、淋巴结 【正确答案】 C 【答案解析】 14、 干化学尿糖检测原理是 A、葡萄糖氧化酶法 B、多聚电解质离子解离法 C、酸碱指示剂法 D、pH指示剂蛋白质误差法 E、血红蛋白类过氧化物酶法 【正确答案】 A 【答案解析】 尿糖测定采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法。 15、 诊断支原体引起的原发性非典型性肺炎的血清学试验中，临床最常用的是 A、补体结合试验 B、免疫荧光技术 C、冷凝剂试验 D、间接凝集
是一个很好的解决方案。先确定抗体是否适合自己的实验，可以避免因为抗体质量投诉耽误实验安排。 在价格方面，需要谨记，最贵的不一定就是最好的，最适合你的实验的才是最好的。花很多钱买到很贵的抗体，再花上很长的时间去投诉的情况并不少见。只买对的，不买贵的。在选择价格的时候还要注意规格大小、抗体浓度、效价范围等，要综合考虑。在规格方面，根据最终可以稀释成的工作液的量的来衡量更为准确。很多老品牌提供的抗体产品基本都是以大包装为主，就单个课题的实验而言，过大的包装有时会造成很大的浪费。目前
范围最吻合或贴近的细胞数量； 其次拟合出forskolin的EC50或EC80（对于弱效的激动剂，可能选择EC50更加敏感些，但选择EC80则提供的检测窗口更大些），确定forskolin的用量； 最后，做两条激动剂依赖的量效关系，一条是在有拮抗剂（参考最大量）的情况下，另一条是在没有拮抗剂的情况下，两条曲线作于一张图上，选择差别最大的那个浓度点，一般是EC80。 牙刷小妮 楼主你最后用的是哪个公司的camp试剂
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