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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
39
- 英文名：
Repel-Silane
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
200ml
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：剥离硅烷规格
英文名称：Repel-Silane
产品规格：200ml
发货周期：1～3天
本品为剥离硅烷，组分主要为4%的烷。备聚丙烯酰凝胶时，常使用Bind-Silane（亲和硅烷）处理长玻璃板，使凝胶与之粘贴。用Repel-Silane（剥离硅烷）处理短玻璃板，使凝胶易于分离。
使用方法
制备聚丙烯酰凝胶时，请先将长、短玻璃板用1M的NaOH浸泡一段时间，并用洗涤剂清洗一遍，之后用水洗掉洗涤剂，再用去离子水冲洗干净。最后用乙醇擦拭玻璃板。
1长玻璃板的处理
每次铺胶前均需用亲和硅烷对长玻璃板进行处理。
1）用镜头纸蘸取少许亲和硅烷溶液（1ml左右，视玻璃板大小而定）涂在长玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
2）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的亲和硅烷。
【注】或用95%的乙醇清洗长玻璃板3次，以去除多余的亲和硅烷。
2短玻璃板的处理
每次铺胶前均需用剥离硅烷对短玻璃板进行硅化处理。
1）处理短玻璃板前必需更换手套，以防手套上的亲和硅烷污染短玻璃板，使短玻璃板也粘胶。
2）用镜头纸蘸取适量剥离硅烷溶液（1.5ml左右，视玻璃板大小而定）涂在短玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
3）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的剥离硅烷。
储存条件室温，有效期一年。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
剥离硅烷规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
N(9Fluorenylmethyloxycarbonyl)N'(2chlorobenzyloxycarbonyl)LlysineFmoc(2苄羰)赖133970317
4Fluorophenylhydrazine hydrochloride4肼823858
1,4DIOXANED8氚代二六环17647744
NA柴胡油
20(R)Protopanaxdiol(R型)原人参二
Sodium hydrogen pip1,4diethanesulphonate1,4嗪二单10010670
2FLUOROTHIOANISOLE2茴香655209
Methyl5norbornene2,3dicarboxylic anhydride纳迪克25134218
5Heptyl1,3,4oxadiazole2(3H)thione2巯5庚噁二唑66473107
Diethylphosphorodithioate二代二298066
Diethyl acetylenedicarboxylate炔二羧二762210
HYDROXYETHYL BETACYCLODEXTRIN2羟Β环糊精128446322
Cadmium chloride hydrate镉，水合7790785
RUBIDIUM铷标准溶7440177
Rhodium(III) nitrate铑溶10139589
Yeast Extract 含量： 规格：5 mg/支
YNB含铵;酵母源础,无392 含量： 规格：5 mg/支
Yeast Nitrogen Base without Amino 含量： 规格：5 mg/支
YNB含铵;酵母源础,无392 含量： 规格：5 mg/支
Yeast Nitrogen Base without Amino 含量： 规格：5mg/支
YNB含铵;酵母源础,无392 含量： 规格：20mg/支
Yeast Nitrogen Base without Amino 含量： 规格：20 mg/支
酵母源础,无392YNB 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
剥离硅烷规格BetamethasoneDipropionate48T/96T进口、国产1620BenzethoniumChlorideHPLC≥98%
BetamethasoneSodiumPhosphate48T/96T进口、国产1620BenzocaineHPLC≥98%
BetamethasoneValerate48T/96T进口、国产1620BenzoicAcidHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620BenzonatateHPLC≥98%
BetaxololHydrochloride48T/96T进口、国产16201,4-BenzoquinoneHPLC≥99%
BetazoleHydrochloride48T/96T进口、国产1620HPLC≥99%
BethanecholChloride48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：剥离硅烷规格
英文名称：Repel-Silane
产品规格：200ml
发货周期：1～3天
本品为剥离硅烷，组分主要为4%的烷。备聚丙烯酰凝胶时，常使用Bind-Silane（亲和硅烷）处理长玻璃板，使凝胶与之粘贴。用Repel-Silane（剥离硅烷）处理短玻璃板，使凝胶易于分离。
使用方法
制备聚丙烯酰凝胶时，请先将长、短玻璃板用1M的NaOH浸泡一段时间，并用洗涤剂清洗一遍，之后用水洗掉洗涤剂，再用去离子水冲洗干净。最后用乙醇擦拭玻璃板。
1长玻璃板的处理
每次铺胶前均需用亲和硅烷对长玻璃板进行处理。
1）用镜头纸蘸取少许亲和硅烷溶液（1ml左右，视玻璃板大小而定）涂在长玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
2）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的亲和硅烷。
【注】或用95%的乙醇清洗长玻璃板3次，以去除多余的亲和硅烷。
2短玻璃板的处理
每次铺胶前均需用剥离硅烷对短玻璃板进行硅化处理。
1）处理短玻璃板前必需更换手套，以防手套上的亲和硅烷污染短玻璃板，使短玻璃板也粘胶。
2）用镜头纸蘸取适量剥离硅烷溶液（1.5ml左右，视玻璃板大小而定）涂在短玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
3）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的剥离硅烷。
储存条件室温，有效期一年。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
剥离硅烷规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
N(9Fluorenylmethyloxycarbonyl)N'(2chlorobenzyloxycarbonyl)LlysineFmoc(2苄羰)赖133970317
4Fluorophenylhydrazine hydrochloride4肼823858
1,4DIOXANED8氚代二六环17647744
NA柴胡油
20(R)Protopanaxdiol(R型)原人参二
Sodium hydrogen pip1,4diethanesulphonate1,4嗪二单10010670
2FLUOROTHIOANISOLE2茴香655209
Methyl5norbornene2,3dicarboxylic anhydride纳迪克25134218
5Heptyl1,3,4oxadiazole2(3H)thione2巯5庚噁二唑66473107
Diethylphosphorodithioate二代二298066
Diethyl acetylenedicarboxylate炔二羧二762210
HYDROXYETHYL BETACYCLODEXTRIN2羟Β环糊精128446322
Cadmium chloride hydrate镉，水合7790785
RUBIDIUM铷标准溶7440177
Rhodium(III) nitrate铑溶10139589
Yeast Extract 含量： 规格：5 mg/支
YNB含铵;酵母源础,无392 含量： 规格：5 mg/支
Yeast Nitrogen Base without Amino 含量： 规格：5 mg/支
YNB含铵;酵母源础,无392 含量： 规格：5 mg/支
Yeast Nitrogen Base without Amino 含量： 规格：5mg/支
YNB含铵;酵母源础,无392 含量： 规格：20mg/支
Yeast Nitrogen Base without Amino 含量： 规格：20 mg/支
酵母源础,无392YNB 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
剥离硅烷规格BetamethasoneDipropionate48T/96T进口、国产1620BenzethoniumChlorideHPLC≥98%
BetamethasoneSodiumPhosphate48T/96T进口、国产1620BenzocaineHPLC≥98%
BetamethasoneValerate48T/96T进口、国产1620BenzoicAcidHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620BenzonatateHPLC≥98%
BetaxololHydrochloride48T/96T进口、国产16201,4-BenzoquinoneHPLC≥99%
BetazoleHydrochloride48T/96T进口、国产1620HPLC≥99%
BethanecholChloride48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验相关实验
直径mm 压平宽度（半周长）mm 截留分子量Da 22 34 3500 22 34 7000
通常在整个HPLC系统中，使用.010"ID×1/16"OD的管子是很安全的。使用.010"ID的管子，一般使用的管长度下压降可忽略不计，而且，该内径连接管导致的谱带展宽可以忽略。Upchurch该规格PEEK管颜色为自然色或蓝色（1531和1531B）。 用1.8mmOD的管子取代一些药物系统中使用的含氟聚合物管子。Agilent1100 系统在高压流路中使用新的1/32"OD的管子。PEEK管还有其它尺寸，一般长度为50′和100′。 一个主要的制药
通常在整个HPLC系统中，使用.010"ID×1/16"OD的管子是很安全的。使用.010"ID的管子，一般使用的管长度下压降可忽略不计，而且，该内径连接管导致的谱带展宽可以忽略。Upchurch该规格PEEK管颜色为自然色或蓝色（1531和1531B）。 用1.8mmOD的管子取代一些药物系统中使用的含氟聚合物管子。Agilent1100系统在高压流路中使用新的1/32"OD的管子。PEEK管还有其它尺寸，一般长度为50′和100′。 一个主要的制药
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