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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
Pifithrin-α
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
5mg
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称:p53抑制剂(PFT-α)价格
英文名称:Pifithrin-α
产品规格:5mg
发货周期:1~3天
Pifithrin-α(PFT--α)是一种常用的p53抑制剂,可逆性抑制p53依赖性的基因转录活性如细胞周期蛋白G、p21/waf1/cipl和mdm2蛋白的表达。Pifithrin-α不仅抑制p53介导的由细胞毒素诱导的细胞凋亡,还能抑制DNA损伤诱导的细胞凋亡。Pifithrin-α作用于海马细胞,并降低p53-DNA结合活性水平、抑制caspase活化。Pifithrin-α诱导细胞周期阻断,并显著降低DNA合成。另外,与化疗或放射性共同处理癌症时,Pifithrin-α会减轻化疗或放射性对正常组织的副作用。
靶点p53
CAS63208-82-2
分子式C16H18N2OS?HBr
分子量367.30
外观浅白色粉末
纯度≥95%
溶解性溶于DMSO
储存条件-20℃,有效期24个月
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
p53抑制剂(PFT-α)价格待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
1-BOC-2-啶过酸一水物/高酸一水物/Sodium perborate monohydrate
3-炔-2-过酸/高酸/四水合高酸/四水合过酸盐/Sodium perborate tetrahydrate
反式-3-己烯酸钡/无水钡/重土/Barium oxide
1α-基雄-17β-醇-3-/睾菲/Phenanthrene
基三基化铵聚氧烯蓖麻油EL/聚氧烯(35)蓖麻油/蓖麻油聚氧烯/氧基化蓖麻油/蓖麻油聚氧烯40/Cremophor EL
2,3,4-三基溴对/4-/PCAD
盐酸布比卡因噻吩-2-羧酸酰肼/噻吩-2-羧酸肼/2-噻吩羧酸肼/2-噻吩酰肼/2-噻吩碳酰肼/噻吩-2-碳酸肼/TCH
对二基XTT 盐/3,3-1-(酰基)-3,4-四唑-二(4-氧基-6-)/XTT sodium salt
嗪吖啶/茚/蒽/9(10H)吖啶/9-吖啶/Acridone
3-羟基-4-酸酯酸二/酸酯二盐/Disodium phenyl phosphate hydrate
p53抑制剂(PFT-α)价格即用型蓝白T载体E型(无RNA启动子,无MCS) 规格HPLC≥98%;10mgGinsenoside Rb1
可保种型蓝白T载体 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rb2
克必隆B载体 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rb3
克必隆G载体 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rc
克必隆零背景T载体(暂停供货) 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rd
质粒(载体)系列产品 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Re
质粒(载体)系列产品 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rf
LIC克隆 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rg1
PCR专用LIC克隆套装 规格HPLC≥98%;1mgGinsenoside Rg2
DNA 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rg3
EcoR I-Not-BamH接头 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rh2
Lambda DNA(A) 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rh3
Lambda DNA(B) 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rh4
Lambda DNA(C) 规格HPLC≥98%;20mgGinsenoside Rk3
M13mp18DNA(A) 规格HPLC≥98%;20mgGinsenosideRo
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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