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- 详细信息
- 文献和实验
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47
- 英文名：
Antigen Retrieval Buffer (50×EDTA Buffer, pH 8.0)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ml
中文名称：EDTA抗原修复液(50×)规格
英文名称：Antigen Retrieval Buffer (50×EDTA Buffer, pH 8.0)
产品规格：100ml
发货周期：1～3天
免疫染色实验，细胞或组织往往需要经、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构，然而此步操作通常会封闭抗原决定簇，使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应，从而引起染色信号衰减，甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于1）醛类固定剂导致组织上的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键，从而封闭抗原表位；2）醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联（cross-link），形成醛交联蛋白，导致抗原表位被封闭。因此，需要对固定组织进行抗原修复（antigenretrieval，AR）来逆转被掩盖的抗原表位，使其重新暴露出来，恢复抗原表位-抗体的结合能力，从而改善染色效果。
抗原修复的方法非常多，主要有热诱导的抗原修复（HeatInducedEpitopeRetrieval，HIER）和酶诱导的抗原修复（ProteolyticInducedEpitopeRetrieval），修复方法的选择需要考虑到抗原表达程度、抗体要求、组织类型以及组织固定方法等因素。作为免疫染色至关重要的一步，抗原修复方法的选择、温度、pH值、修复时间、修复介质都会影响到实验结果。实验者需根据自身的实验体系以及实验条件来选择恰当的修复溶液，从而达到最佳的修复效果。
本品为EDTA抗原修复缓冲液，pH8.0，是一款非常经典且应用广泛的热修复缓冲液之一，适用于大多数的抗原，经此缓冲液修复后的染色信号明显得以增强。本品特别适合用于石蜡切片，也可用于冰冻切片等其他样本。本品为50×浓缩的EDTA抗原修复液，使用前需用ddH2O稀释成1×工作液。按照每个片子需10ml抗原修复液的量来计算，约可做500个样品。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）抗原修复通常用于醛类固定的石蜡切片，而冰冻切片由于组织比较脆弱，易在修复过程中被破坏掉，因此比较少进行抗原修复。然而醛类固定的冰冻切片同样会发生蛋白交联而封闭抗原表位，导致染色效果不佳。很多文献资料表明采用适当的方法进行冰冻切片抗原修复，也能显著改善染色效果。特别是当染色效果欠佳的前提下，可考虑进行冰冻切片的抗原修复。
3）修复过程中一定要使用足量的修复液（1×）来完全浸没组织切片。
4）不同pH的修复液对修复效果的影响很明显，归于传统习惯使用柠檬酸钠修复液，pH6.0（SY0763）比较多。目前很多资料表明绝大多数抗原（抗体），使用高pH值（约8.0或9.0）的修复液能得到更好的染色效果。
储存条件-20℃，有效期一年。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．EDTA抗原修复液(50×)规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
Trifluoromethanesulfonic acid tertbutyldimethylsilyl ester叔二硅三69739340
Butylmagnesium chloride正镁693049
4Amino3bromobenzonitrile43溴50397745
pPhenylenediamine dihydrochloride对624180
CANDELILLA WAX小烛树蜡8006448
LUTETIUM镥标准溶7439943
Methyl 6chloronicotinate6烟73781916
ZDLALAOHNCBZDL4132869
4(Chloromethyl)benzoyl chloride4()酰876084
Calcium nitrate tetrahydrate钙13477344
2,2'Bipyridine4,4'dicarboxylic acid2,2'联4,4'二6813383
NAM199
Solvent Black 3苏丹B4197255
SUDAN BLUE14对蒽醌128858
2,3HEPTANEDIONE2,3庚二35163
酰 含量：≥ 98% 规格：20mg/支
PMSF 含量：≥ 98% 规格：20mg/支
对二 含量： 规格：20mg/支
PNPP 含量：≥ 98% 规格：10mg/支
聚二10000 PEG10000 含量：≥ 98% 规格：10mg/支
Poly(ethylene glycol) average mol wt 10,000 含量：≥98% 规格：10mg/支
多聚半糖 含量：≥ 97% 规格：5mg/支
Polygalacturonic acid 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
EDTA抗原修复液(50×)规格2-Butanol48T/96T进口、国产1620HPLC≥95%
ButorphanolTartrateCIV48T/96T进口、国产16208-BromotheophyllineHPLC≥98%
ButylAcetate48T/96T进口、国产1620BromperidolDecanoateHPLC≥98%
ButylatedHydroxytoluene48T/96T进口、国产1620BrompheniramineMaleateHPLC≥98%
2-tert-Butyl-4-hydroxyanisole48T/96T进口、国产1620BudesonideHPLC≥98%
3-tert-Butyl-4-hydroxyanisole48T/96T进口、国产1620BumetanideHPLC≥98%
tert-Butylmethylether48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
英文名称：Antigen Retrieval Buffer (50×EDTA Buffer, pH 8.0)
产品规格：100ml
发货周期：1～3天
免疫染色实验，细胞或组织往往需要经、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构，然而此步操作通常会封闭抗原决定簇，使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应，从而引起染色信号衰减，甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于1）醛类固定剂导致组织上的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键，从而封闭抗原表位；2）醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联（cross-link），形成醛交联蛋白，导致抗原表位被封闭。因此，需要对固定组织进行抗原修复（antigenretrieval，AR）来逆转被掩盖的抗原表位，使其重新暴露出来，恢复抗原表位-抗体的结合能力，从而改善染色效果。
抗原修复的方法非常多，主要有热诱导的抗原修复（HeatInducedEpitopeRetrieval，HIER）和酶诱导的抗原修复（ProteolyticInducedEpitopeRetrieval），修复方法的选择需要考虑到抗原表达程度、抗体要求、组织类型以及组织固定方法等因素。作为免疫染色至关重要的一步，抗原修复方法的选择、温度、pH值、修复时间、修复介质都会影响到实验结果。实验者需根据自身的实验体系以及实验条件来选择恰当的修复溶液，从而达到最佳的修复效果。
本品为EDTA抗原修复缓冲液，pH8.0，是一款非常经典且应用广泛的热修复缓冲液之一，适用于大多数的抗原，经此缓冲液修复后的染色信号明显得以增强。本品特别适合用于石蜡切片，也可用于冰冻切片等其他样本。本品为50×浓缩的EDTA抗原修复液，使用前需用ddH2O稀释成1×工作液。按照每个片子需10ml抗原修复液的量来计算，约可做500个样品。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）抗原修复通常用于醛类固定的石蜡切片，而冰冻切片由于组织比较脆弱，易在修复过程中被破坏掉，因此比较少进行抗原修复。然而醛类固定的冰冻切片同样会发生蛋白交联而封闭抗原表位，导致染色效果不佳。很多文献资料表明采用适当的方法进行冰冻切片抗原修复，也能显著改善染色效果。特别是当染色效果欠佳的前提下，可考虑进行冰冻切片的抗原修复。
3）修复过程中一定要使用足量的修复液（1×）来完全浸没组织切片。
4）不同pH的修复液对修复效果的影响很明显，归于传统习惯使用柠檬酸钠修复液，pH6.0（SY0763）比较多。目前很多资料表明绝大多数抗原（抗体），使用高pH值（约8.0或9.0）的修复液能得到更好的染色效果。
储存条件-20℃，有效期一年。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：1．EDTA抗原修复液(50×)规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
Trifluoromethanesulfonic acid tertbutyldimethylsilyl ester叔二硅三69739340
Butylmagnesium chloride正镁693049
4Amino3bromobenzonitrile43溴50397745
pPhenylenediamine dihydrochloride对624180
CANDELILLA WAX小烛树蜡8006448
LUTETIUM镥标准溶7439943
Methyl 6chloronicotinate6烟73781916
ZDLALAOHNCBZDL4132869
4(Chloromethyl)benzoyl chloride4()酰876084
Calcium nitrate tetrahydrate钙13477344
2,2'Bipyridine4,4'dicarboxylic acid2,2'联4,4'二6813383
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Solvent Black 3苏丹B4197255
SUDAN BLUE14对蒽醌128858
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酰 含量：≥ 98% 规格：20mg/支
PMSF 含量：≥ 98% 规格：20mg/支
对二 含量： 规格：20mg/支
PNPP 含量：≥ 98% 规格：10mg/支
聚二10000 PEG10000 含量：≥ 98% 规格：10mg/支
Poly(ethylene glycol) average mol wt 10,000 含量：≥98% 规格：10mg/支
多聚半糖 含量：≥ 97% 规格：5mg/支
Polygalacturonic acid 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
EDTA抗原修复液(50×)规格2-Butanol48T/96T进口、国产1620HPLC≥95%
ButorphanolTartrateCIV48T/96T进口、国产16208-BromotheophyllineHPLC≥98%
ButylAcetate48T/96T进口、国产1620BromperidolDecanoateHPLC≥98%
ButylatedHydroxytoluene48T/96T进口、国产1620BrompheniramineMaleateHPLC≥98%
2-tert-Butyl-4-hydroxyanisole48T/96T进口、国产1620BudesonideHPLC≥98%
3-tert-Butyl-4-hydroxyanisole48T/96T进口、国产1620BumetanideHPLC≥98%
tert-Butylmethylether48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
通常在整个HPLC系统中，使用.010"ID×1/16"OD的管子是很安全的。使用.010"ID的管子，一般使用的管长度下压降可忽略不计，而且，该内径连接管导致的谱带展宽可以忽略。Upchurch该规格PEEK管颜色为自然色或蓝色（1531和1531B）。 用1.8mmOD的管子取代一些药物系统中使用的含氟聚合物管子。Agilent1100 系统在高压流路中使用新的1/32"OD的管子。PEEK管还有其它尺寸，一般长度为50′和100′。 一个主要的制药
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