小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒哪家好

【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒哪家好
英文名称：Immunohischemistry Kit for Mouse Primary Antibody
产品规格：150T
发货周期：1～3天
本试剂盒可用于检测以小鼠单克隆或多克隆抗体为一抗的免疫组化实验，检测原理基于高特异性高亲和力的链霉亲和素-生物素结合已固定或培养细胞的抗原与一抗形成抗原抗体复合物，生物素化二抗特异性结合上述复合物，经辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素特异性识别生物素（即抗原所在位置），最后经辣根过氧化物酶底物显色即可检测相应抗原。
本品可适用于多种类型样本，如石蜡包埋切片、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本等。
产品组份
封闭液————————————7.5ml
生物素标记抗小鼠二抗————7.5ml
HRP标记链霉亲和素————7.5ml
20×DAB底物缓冲液————400µl
20×H2O2浓缩液————400µl
20×DAB浓缩液————400µl
使用方法
1样品准备
染色前用PBS浸泡组织或细胞涂片10min。石蜡切片于室温下用二甲常规脱蜡、入水、抗原修复。
【注】从此步骤起，严禁标本或组织切片干燥。
2染色（以石蜡切片为例）
1）将处理好的石蜡切片放入3%H2O2-甲醇溶液中浸泡10min，以消除内源性过氧化氢酶的作用。
2）清洗PBS清洗3次，2min/次。
3）封闭加一滴封闭液于组织切片上（需完全覆盖待检组织）孵育10min。
4）倒掉或吸干液体（不要冲洗）。
5）一抗每张切片加2滴（100μl）或适量一抗（需完全覆盖待检组织），湿盒内孵育30-60min。
6）清洗PBS清洗3次，2min/次。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒哪家好待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
6Chloro2hexanone6210226309
(R)(+)1Benzyl3pyrrolidinol(R)(+)N苄3羟101930078
2Cyano3,5difluoropyridine3，5二2298709292
N[(tertButoxy)carbonyl]DtryptophanBOCD色5241645
N,N,N',N'TETRAMETHYLBENZIDINE四联366290
4Bromomethylbenzoic acid4溴6232888
GLYCEROL 1,3DIMETHACRYLATE二甘油1830780
Fenoprofen calcium菲诺洛芬钙53746455
HTHR(TBU)OHO叔L苏4378136
PAM RESINPAM RESIN
Polyphyllin VII重楼皂苷 VII76296758
Cineole桉叶油470826
Polyvinylidene fluoride聚偏树脂24937799
NERYL ACETATE橙花141128
Cholesterol胆固57885
苄青　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
Ampicillin, Sodium Salt　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
AMPSO, Free Acid　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
AMPSO, Free Acid　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
支链淀　含量：≥ 98%　规格：20mg/支
Amylopectin, from Potato Starch　含量：　规格：20mg/支
直链淀　含量：≥ 98%　规格：10mg/支
Amylose, from Potato　含量：≥ 98%　规格：10mg/支
小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒哪家好48T/96T进口、国产1620BoricAcid(AS)HPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620BretyliumTosylateHPLC≥98%
BuspironeHydrochloride48T/96T进口、国产1620BrinzolamideHPLC≥98%
ButabarbitalCIII48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
ButalbitalCIII48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
Butamben48T/96T进口、国产1620BromazepamCIV(AS)HPLC≥99%
1-Butanol48T/96T进口、国产1620BromocriptineMesylateHPLC≥98%
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。