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- 2025年07月13日
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- 文献和实验
- 技术资料
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52
- 英文名：
kobe2602
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1mL(10mM)|50mg|100mg|250mg
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：H-Ras·GTP与c-Raf-1RBD结合抑制剂(kobe2602)规格
英文名称：kobe2602
产品规格：1mL(10mM)|50mg|100mg|250mg
发货周期：1～3天
kobe2602是竞争性抑制H-Ras·GTP与c-Raf-1RBD的结合，Ki为149μM。
注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！
CAS号454453-49-7
纯度96.97%
分子量419.31
储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Potassium Phosphate Solution，0.2M, pH7.6
Potassium Phosphate Solution，0.2M, pH8.0
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.0
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.2
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.4
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.5
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.6
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH8.0
H-Ras·GTP与c-Raf-1RBD结合抑制剂(kobe2602)规格10mgCAS号一次性接种环 10ul（黄色） 1支独立包装 10支一包83657-22-133708-72-496T协同转运蛋白4(KCC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅹ血浆5mgfgl2 60-10-6高端化学试剂复制蛋白A1(RPA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)eaCAS号一次性接种环 1ul（蓝色） 1支独立包装 10支一包83657-22-1511-89-796T协同转运蛋白2(KCC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅺ血浆5mgTNFSF14458-37-7高端化学试剂Discs大同源物3(DLG3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
eaCAS号一次性接种环 1ul（蓝色） 1支独立包装 10支一包83657-22-1511-89-796T协同转运蛋白2(KCC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅺ血浆5mgTNFSF14458-37-7高端化学试剂Discs大同源物3(DLG3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号一次性接种环 10ul（蓝色） 停售83657-22-15928-26-796T协同转运蛋白3(KCC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅻ血浆5mgCFH-Ab458-37-7高端化学试剂赖特异性去化酶4A(KDM4A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
50mgCAS号一次性接种环 10ul（蓝色） 停售83657-22-15928-26-796T协同转运蛋白3(KCC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅻ血浆5mgCFH-Ab458-37-7高端化学试剂赖特异性去化酶4A(KDM4A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号一次性吸管 3mL30918-54-8465-74-796T趋化子C-C-元受体7(CCR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%缓冲5mgC3c-Ab458-37-7高端化学试剂复制蛋白A1(RPA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
10mgCAS号一次性吸管 3mL30918-54-8465-74-796T趋化子C-C-元受体7(CCR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%缓冲5mgC3c-Ab458-37-7高端化学试剂复制蛋白A1(RPA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号一次性吸管 5mL24939-03-527530-67-296Tβ2-微球蛋白(β2M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.2<含复溶>5mgADAMTS13-Ab458-37-7高端化学试剂蛋腺苷转移酶Ⅰα(MAT1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
25mgCAS号一次性吸管 5mL24939-03-527530-67-296Tβ2-微球蛋白(β2M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.2<含复溶>5mgADAMTS13-Ab458-37-7高端化学试剂蛋腺苷转移酶Ⅰα(MAT1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号医用脱脂棉465-13-496T三叶子3(TFF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)TLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.2-1.4<含复溶>5mgCFI14726-28-4高端化学试剂兴奋性转运蛋白5(EAAT5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
操作步骤(仅供参考)：
1、H-Ras·GTP与c-Raf-1RBD结合抑制剂(kobe2602)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：H-Ras·GTP与c-Raf-1RBD结合抑制剂(kobe2602)规格
英文名称：kobe2602
产品规格：1mL(10mM)|50mg|100mg|250mg
发货周期：1～3天
kobe2602是竞争性抑制H-Ras·GTP与c-Raf-1RBD的结合，Ki为149μM。
注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！
CAS号454453-49-7
纯度96.97%
分子量419.31
储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Potassium Phosphate Solution，0.2M, pH7.6
Potassium Phosphate Solution，0.2M, pH8.0
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.0
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.2
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.4
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.5
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.6
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH8.0
H-Ras·GTP与c-Raf-1RBD结合抑制剂(kobe2602)规格10mgCAS号一次性接种环 10ul（黄色） 1支独立包装 10支一包83657-22-133708-72-496T协同转运蛋白4(KCC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅹ血浆5mgfgl2 60-10-6高端化学试剂复制蛋白A1(RPA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)eaCAS号一次性接种环 1ul（蓝色） 1支独立包装 10支一包83657-22-1511-89-796T协同转运蛋白2(KCC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅺ血浆5mgTNFSF14458-37-7高端化学试剂Discs大同源物3(DLG3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
eaCAS号一次性接种环 1ul（蓝色） 1支独立包装 10支一包83657-22-1511-89-796T协同转运蛋白2(KCC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅺ血浆5mgTNFSF14458-37-7高端化学试剂Discs大同源物3(DLG3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号一次性接种环 10ul（蓝色） 停售83657-22-15928-26-796T协同转运蛋白3(KCC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅻ血浆5mgCFH-Ab458-37-7高端化学试剂赖特异性去化酶4A(KDM4A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
50mgCAS号一次性接种环 10ul（蓝色） 停售83657-22-15928-26-796T协同转运蛋白3(KCC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%乏子Ⅻ血浆5mgCFH-Ab458-37-7高端化学试剂赖特异性去化酶4A(KDM4A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号一次性吸管 3mL30918-54-8465-74-796T趋化子C-C-元受体7(CCR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%缓冲5mgC3c-Ab458-37-7高端化学试剂复制蛋白A1(RPA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
10mgCAS号一次性吸管 3mL30918-54-8465-74-796T趋化子C-C-元受体7(CCR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%缓冲5mgC3c-Ab458-37-7高端化学试剂复制蛋白A1(RPA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号一次性吸管 5mL24939-03-527530-67-296Tβ2-微球蛋白(β2M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.2<含复溶>5mgADAMTS13-Ab458-37-7高端化学试剂蛋腺苷转移酶Ⅰα(MAT1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
25mgCAS号一次性吸管 5mL24939-03-527530-67-296Tβ2-微球蛋白(β2M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.2<含复溶>5mgADAMTS13-Ab458-37-7高端化学试剂蛋腺苷转移酶Ⅰα(MAT1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号医用脱脂棉465-13-496T三叶子3(TFF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)TLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.2-1.4<含复溶>5mgCFI14726-28-4高端化学试剂兴奋性转运蛋白5(EAAT5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
操作步骤(仅供参考)：
1、H-Ras·GTP与c-Raf-1RBD结合抑制剂(kobe2602)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验相关实验
原因？蛋白酶抑制剂单加PMSF行吗？解答：怀疑是样品问题，可能是：1，样品不能反复冻融；2，样品未加蛋白酶抑制剂。同时，建议检查Western Blot过程， 提高一抗浓度。对于加蛋白酶抑制剂来说，一般加PMSF就可以了，最好能多加几中种蛋白酶抑制剂。C.细胞水平要做western blot，多少细胞提的蛋白够做western blot？ 解答：一般5×10^6就足够了D.同一样品能同时提RNA又提蛋白么？这样对western blot有无影响？ 解答：能，没有问题，我们做过。E. 同一
量已加到120μg，换了个santa cloz的一抗仍不行。是什么原因？蛋白酶抑制剂单加PMSF行吗？解答：怀疑是样品问题，可能是：1，样品不能反复冻融；2，样品未加蛋白酶抑制剂。同时，建议检查Western Blot过程， 提高一抗浓度。对于加蛋白酶抑制剂来说，一般加PMSF就可以了，最好能多加几中种蛋白酶抑制剂。C. 细胞水平要做Western Blot，多少细胞提的蛋白够Western Blot？解答：一般地5* 106就足够了。D. 同一样品能同时提RNA又提蛋白吗，这样对Western
量已加到120μg，换了个santa cloz的一抗仍不行。是什么原因？蛋白酶抑制剂单加PMSF行吗？解答：怀疑是样品问题，可能是：1，样品不能反复冻融；2，样品未加蛋白酶抑制剂。同时，建议检查Western Blot过程， 提高一抗浓度。对于加蛋白酶抑制剂来说，一般加PMSF就可以了，最好能多加几中种蛋白酶抑制剂。C. 同一蛋白样品能同时进行两种因子的Western Blot检测吗？解答：当然可以，有的甚至可以同时测几十种样品。D. 如果目标蛋白是膜蛋白或是胞浆蛋白，操作需要注意什么？解答
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