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- 详细信息
- 文献和实验
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39
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
500ml
1、BSATBS-T(含有0.05%Tween-20)缓冲系统封闭液哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:BSATBS-T(含有0.05%Tween-20)缓冲系统封闭液哪家好
英文名称:
产品规格:500ml
发货周期:1~3天
产品保存4℃保存,一个月有效
产品特点
1.相容性好,可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比,背景更干净。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
4Chloro3nitrobenzoic acid4396991
2Chloro4nitroaniline24121879
Tetramethylol acetylenediurea四羟甘脲5395506
1(4Chlorophenyl)3methyl2pyrazolin5one1(4)32唑啉513024903
N(tertButoxycarbonyl)ObenzylDthreonineBocO苄D苏69355993
Hexamethylphosphoramide六酰三680319
Formylhydrazine酰肼624840
Ethyl thiazole5carboxylate噻唑532955229
5Bromopyridine2carboxylic acid5溴230766111
Brilliant Cresyl Blue灿烂蓝81029052
1HEPTENE1庚592767
HGLU2CHLOROTRITYL RESINHGLU2CHLOROTRITYL RESIN
1,1Diethoxy3,7dimethylocta2,6diene柠檬二缩7492662
Coumarin香豆素91645
gammaDecalactone位内706149
Glucose Oxidase, Aspergillus Niger 含量: 规格:5mg/支
葡萄糖6脱酶 含量:HPLC≥95% 规格:5mg/支
Glucose6Phosphate Dehydrogenase 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
二 (25%) 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
Glutaraldehyde solution 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
二 (50%) 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
Glutaraldehyde solution 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
型谷胱甘肽 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
BSATBS-T(含有0.05%Tween-20)缓冲系统封闭液哪家好PLCZ1肌醇脂酶PLCZ1抗体大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)ELISA试剂盒7695912
PLDL1/PLCE脂酶C1样蛋白抗体大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒893081
CPXCR1肿瘤/睾抗原77抗体大鼠碳酶2(CA2)ELISA试剂盒64461821
PLTP脂转移蛋白抗体大鼠色素上皮衍生子(PEDF)ELISA试剂盒30536197
TM9SF4跨膜蛋白9家族成员4抗体大鼠解整合素样蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒173532155
RDH13视黄醇脱酶13抗体大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒5391526
NIMP/RTN4IP1NOGO相互作用线粒体蛋白1抗体大鼠胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒1156190
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文献和实验E L I S A w i t h p l a t e l e t s
PBS-PF (paraformaldehyde), 2% PBS-tween 20, 0.05% glycine (x1) - BSA, 1 mg/ml revelation solution (citrate/phosphate buffer), pH 5, 1 L, water solution = citrique acid, 5.1065 g + Na2 HPO4 x 2H2 0, 9.08 g
时间分辨荧光免疫TrFIA分析(以血清中T3和T4检测为例)
光,就可以完全排除非特异本地荧光的干扰。 【试剂及材料】 (1)分析缓冲液:0.1mol/L,pH7.5 Tris-HCl缓冲液,其中含0.3mol/L三氯醋酸钠,0.1%BSA,0.02%NaN3 ; (2)洗涤液:生理盐水,含0.1%Tween-20; (3)荧光增强液:b-萘酰三氟丙酮6mg,三辛基磷化氢的氧化物19.33g,邻苯二甲酸氢甲1.3g,冰醋酸6ml,Tween-20 0.2ml, 加三蒸水至500ml, 再加Triton-100 1ml,置37℃水浴至溶解
的、短命荧光全部衰变后,再测量稀土元素螯合物的特异荧光,就可以完全排除非特异本地荧光的干扰。 【试剂及材料】 (1)分析缓冲液:0.1mol/L,pH7.5 Tris-HCl缓冲液,其中含0.3mol/L三氯醋酸钠,0.1%BSA,0.02%NaN3 ; (2)洗涤液:生理盐水,含0.1%Tween-20; (3)荧光增强液:b-萘酰三氟丙酮6mg,三辛基磷化氢的氧化物19.33g,邻苯二甲酸氢甲1.3g,冰醋酸6ml,Tween-20 0.2ml, 加三蒸水至500
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