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江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存:
98
- 适应物种:
人/植物/小鼠/大鼠/动物
自主研发游离蛋白S试剂盒 校准液的正确使用办法:
① 结合各实验室条件选择适合自已实验室的校准品,如有条件可进行系统溯源。
② 满足在同一方法学、同一测定条件、与理论计算的factor值差异不大,没有发现有明显影响因素,方可进行校正测定。
③ 建立一个可靠的参考系统作为准确性基础,然后将准确性转移到使用方法测定中去,使使用方法测定结果可溯源到参考系统所提供的准确性基础上来。
自主研发游离蛋白S试剂盒 试验过程繁琐,操作者们所犯的问题也各有不同。现我公司技能就对构成ELISA试剂盒标准品溢值的原因解析:
① 样品/标准品不正确稀释。
② 孵育时间/温度不正确。
③ 在孵育时为盖板掩盖物:在孵育时需盖上板掩盖物,以避免液体蒸腾或孵育期间的污染。每个试剂盒内均有足够数量的酶联板掩盖物。
④ 检测波长不正确:要确保分光光度剂的检测波长是正确的。
⑤ TMB底物的显色时间过长:请监控显色时间。说明书中所示的显色时间或许由于温度和其它检测条件的不同而稍有改动。
⑥ 样品不适合此检测:在说明书中会列出每种产品的适用标本范围,超出范围的标本或许不适于此试剂盒或许检测条件需求探索。
⑦ 样品/标准品污染:样品或标准品的污染或许会导致检测效果“溢值”。
⑧ 偶然试剂不正确稀释:要严格按照说明书来稀释偶然试剂,浓度过高会构成OD的“溢值”HRP偶然试剂的不正确稀释
⑨ 所用稀释液不对:只能运用相应试剂盒内的稀释液稀释样品和标准品。
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文献和实验人游离蛋白S ( FPS )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 FPS 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 FPS与单抗结合,加入生物素化的抗人 FPS ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在 450nm
/RNA同时加到吸附柱上去。如何去除DNA是第一个难点。否则会残留大量DNA。两个技术难点的没有掌握导致了国内公司包括的第二种试剂盒失败。国外公司因为没有掌握第一难点,裂解液里面没有去除多糖多酚成分,所以包括Qiagen的RNeasy plant mini kit盒子也常常不能成功提取较复杂植物RNA样品如黑加仑、冬青等植物样品。 北京艾德莱生物的研发人员经过3年的不断研发改良,针对多糖多酚植物的特点,和这两种试剂盒失败的原因,开发出了世界领先水平的RN09 EASYspin植物RNA快速提取试剂盒
填补Qiagen空白的植物RNA提取试剂盒(包括多糖多酚困难样品)
。 第二种试剂盒失败的原因:直接裂解过柱子的方法是目前最先进的方法,但是也是技术含量最高的方法。这个方法采用裂解液(不含苯酚,氯仿)直接裂解,RNA/DNA同时过柱子,然后在柱子上面直接分离RNA/DNA,所以,这种方法的优点第一在于,避免了使用trizol在多糖多酚下不能成功分离RNA/DNA的弊端、第二在于,不使用有毒的苯酚氯仿。但是正是因为其技术先进,所以难度很高,国内厂家包括进口公司有两个技术难点一直没有突破。第一,裂解液的成分必须针对去除多糖多酚进行研发添加去多糖多酚,代谢产物成分
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