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普通RIPA裂解液(组织/细胞)

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  • 上海谷研
  • GOY-D6341
  • 进口、国产
  • 2025年07月12日
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    • 英文名

      RIPA buffer

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海谷研

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100ml

    特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
    产品名称 普通RIPA裂解液(组织/细胞)
    英文名称 RIPA buffer
    规格 100ml

    别名:蛋白提取试剂盒
    英文名称:RIPA buffer
    储存条件:附件PMSF-20℃,裂解液4℃。有效期:1年
    单位:瓶
    普通RIPA裂解液(组织/细胞)产品配有一支PMSF(100mM,1.5ml)
    产品简介:RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。
    使用说明
    如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
    根据使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,混匀备用 (PMSF现用现加)。
    1、样品前处理:
    a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
    b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液,用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 5-10×105细胞/管,然后再裂解。
    c)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液
    (如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量) 。
    用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
    2、后处理:
    将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
    以下是普通RIPA裂解液(组织/细胞)的相关产品:
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    Praeruptorin A醋酸泼尼松龙  分子式:C10H20O3  性状:Oil  纯度:%
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    实验操作步骤:
    是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
    方法/步骤
    96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
    向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
    将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
    向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
    5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
    用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
    如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。

    产品细节图片1
    蛋白质与免疫功能:
    蛋白质是机体免疫防御功能的物质基础,当蛋白质营养不良时,其有关组织器官的结构和功能均受到不同程度的影响。
      (一)免疫器官
      蛋白质热能营养不良明显影响胸腺及外周淋巴器官的正常结构。且这种损伤是不可逆的,一旦受损其结构和功能恢复极为缓慢。
      (二)细胞免疫
      蛋白质营养不良时主要影响T淋巴细胞的数量和功能,医学教|育网搜集整理外周血中T淋巴细胞总数显著减少,对抗原诱导的增殖反应降低。
      (三)体液免疫
      蛋白质营养不良时,上皮及粘膜组织分泌液中SIgA显著减少,溶菌酶水平下降,使其组织抵抗力降低,甚至可导致感染扩散。


     

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