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文献和实验3.9不含克隆,而7.4%±1.9包含多个克隆)。图4C绘制了来自x.sight和有限稀释的每块板的原始单细胞克隆。为了直接测量单细胞活力,在第0天捕获了荧光标记的细胞,使其生长10天。对于给定的板,通过将单克隆孔的数目(单细胞孔长起来的)除以单细胞孔的数目来获得生存力百分比。x.sight的平均生存力为84%,而极限稀释度则为81%。同样,比较了来自x.sight的单细胞来源克隆对不同细胞类型的生存力(图4E)。通常,使用CHO,HEK和其他常见细胞系时,观察到的典型生存力大于75%。重要的是要注意
坚实的液滴。 ⑥将含类器官的BME以每滴约10μl的体积接种于预热的24孔悬浮细胞培养板底部,每孔接种3-4滴。 关键提示: 类器官重悬于BME后,应尽快进行接种,因为BME可能会在试管或移液器吸头中凝固。 培养板应提前置于37℃湿润培养箱中过夜预热。若预热不充分,BME液滴会在培养板表面立即变平,类器官更容易贴附于培养板底部。 不要直接将培养基加在BME液滴上方,以免破坏液滴。 ⑦将培养板置于37℃、5%(体积分数)CO₂的湿润培养箱中培养。 ⑧每2-3天小心吸去孔中的培养基,更换为新鲜
环素 抗体酶标记物,用TMB 底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在 450nm 波长下进行检测,吸光值与样品中 四环素 含量成反比 ,通过标准曲线 计算样品 中 四环素 的含量。 3 试剂盒组成 3. 1 预包被的 四环素 偶联抗原的可拆酶标板:1 块( 12 孔 ×8 条)。 3. 2 四环素 标准品:6 瓶( 1ml/ 瓶),含量分别是: 0ppb, 3 ppb, 9 ppb, 27 ppb, 81 ppb ,243
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