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- 供应商：
上海一研
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46
- 英文名：
小鼠骨肉瘤成骨细胞
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
电询
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
成骨细胞
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
BALB/c 器官: 骨 疾病: 骨肉瘤 来源转移灶: 肺 细胞类型: 成骨细胞
- 规格：
详见说明书
培养：
1.取出小鼠后沥干酒精，放入超净台内，固定在泡沫板上。
2.用镊子提起皮肤，用解剖剪剪开皮肤一个横切口，将皮肤向上撕开，然后剪开肌肉等，暴露出腹腔，在左侧找到脾脏，用弯头眼科镊取出脾脏，置于无菌培养皿中。
3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次，并剔除多余无用的组织。
4.将筛网置于平皿中，脾脏置于筛网上，用弯头镊镊住，轻轻在筛网上进行碾磨，同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。
5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中，离心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。
6.加入10ml培养液，吹打混匀，取样计数。
7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中，轻轻摇晃混匀，在培养瓶上。
产品名称： 小鼠骨肉瘤成骨细胞培养
商品货号： EY-Z6348
中文名称： 小鼠骨肉瘤成骨细胞
组织来源：BALB/c 器官: 骨 疾病: 骨肉瘤 来源转移灶: 肺 细胞类型: 成骨细胞
形态特征：成骨细胞
特征特性：抗原表达: CD31 阳性 [PubMed:1315100] 产物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表达显示其骨家族细胞特性。 在本库通过支原体检测。
细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件：DMEM培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%
细胞冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
复苏细胞步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冻存条件：90%血清，10%DMSO，现用现配
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象
实验事项：
1. 小鼠骨肉瘤成骨细胞培养试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。
小鼠骨肉瘤成骨细胞培养现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，都可以免费再向客户提供一次。
以下是公司正在促销的产品：
Cholecystokinin,CCK ELISA Kit大鼠GDNF elisa检测试剂盒大鼠甲状腺上皮细胞
choline acetyltransterase,ChAT ELISA Kit大鼠Gelsolin elisa检测试剂盒大鼠角膜基质细胞
cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit大鼠GFAP elisa检测试剂盒大鼠角膜上皮细胞
cholesterol,CH ELISA Kit大鼠GH elisa检测试剂盒大鼠角质形成细胞
Monocyte Chemotactic Protein 5,MCP-5 ELISA Kit大鼠GHbA1c elisa检测试剂盒大鼠结肠成纤维细胞
Big Endothelin,Big ET ELISA Kit大鼠GHRL elisa检测试剂盒大鼠结肠平滑肌细胞
prolactin-inhibiting hormone,PIH ELISA Kit大鼠Ghsr elisa检测试剂盒大鼠结肠粘膜上皮细胞
prolactin-releasing hormone,PRH ELISA Kit大鼠GIP elisa检测试剂盒大鼠结膜成纤维细胞
Prolactin/Luteotropic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit大鼠GJA1 elisa检测试剂盒大鼠结膜上皮细胞
oxytocin,OT ELISA Kit大鼠GK elisa检测试剂盒大鼠精原细胞
gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit大鼠Gln elisa检测试剂盒大鼠晶状体上皮细胞，RLEC细胞
growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit大鼠Glp-1 elisa检测试剂盒大鼠颈动脉内皮细胞
Corticotropin-releasing Factor,CRF ELISA Kit大鼠Glp-2 elisa检测试剂盒大鼠颈动脉平滑肌细胞
adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit大鼠GLUL elisa检测试剂盒大鼠口腔黏膜上皮细胞
follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit大鼠GLUT4 elisa检测试剂盒大鼠淋巴管成纤维细胞
thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA KIT大鼠GM-CSF elisa检测试剂盒大鼠淋巴管内皮细胞
小鼠骨肉瘤成骨细胞培养PP1C gamma 蛋白磷酸酶γ1抗体规格 0.1ml
PP-1B 蛋白磷酸酯酶-1B抗体规格 0.1ml
PP1A/PP2CA/PPP1CA 蛋白磷酸酶2Cα抗体规格 0.2ml
POU6F2 转录因子RPF1抗体规格 0.2ml
POT1 端粒保护蛋白1抗体规格 0.2ml
Porimin 前细胞胀亡受体诱导膜损伤蛋白抗体规格 0.2ml
PON1 芳香酯酶1(磷酶)抗体规格 0.1ml
1.取出小鼠后沥干酒精，放入超净台内，固定在泡沫板上。
2.用镊子提起皮肤，用解剖剪剪开皮肤一个横切口，将皮肤向上撕开，然后剪开肌肉等，暴露出腹腔，在左侧找到脾脏，用弯头眼科镊取出脾脏，置于无菌培养皿中。
3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次，并剔除多余无用的组织。
4.将筛网置于平皿中，脾脏置于筛网上，用弯头镊镊住，轻轻在筛网上进行碾磨，同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。
5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中，离心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。
6.加入10ml培养液，吹打混匀，取样计数。
7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中，轻轻摇晃混匀，在培养瓶上。
产品名称： 小鼠骨肉瘤成骨细胞培养
商品货号： EY-Z6348
中文名称： 小鼠骨肉瘤成骨细胞
组织来源：BALB/c 器官: 骨 疾病: 骨肉瘤 来源转移灶: 肺 细胞类型: 成骨细胞
形态特征：成骨细胞
特征特性：抗原表达: CD31 阳性 [PubMed:1315100] 产物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表达显示其骨家族细胞特性。 在本库通过支原体检测。
细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件：DMEM培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%
细胞冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
复苏细胞步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冻存条件：90%血清，10%DMSO，现用现配
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象
实验事项：
1. 小鼠骨肉瘤成骨细胞培养试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。
小鼠骨肉瘤成骨细胞培养现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，都可以免费再向客户提供一次。
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Prolactin/Luteotropic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit大鼠GJA1 elisa检测试剂盒大鼠结膜上皮细胞
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Corticotropin-releasing Factor,CRF ELISA Kit大鼠Glp-2 elisa检测试剂盒大鼠颈动脉平滑肌细胞
adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit大鼠GLUL elisa检测试剂盒大鼠口腔黏膜上皮细胞
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小鼠骨肉瘤成骨细胞培养PP1C gamma 蛋白磷酸酶γ1抗体规格 0.1ml
PP-1B 蛋白磷酸酯酶-1B抗体规格 0.1ml
PP1A/PP2CA/PPP1CA 蛋白磷酸酶2Cα抗体规格 0.2ml
POU6F2 转录因子RPF1抗体规格 0.2ml
POT1 端粒保护蛋白1抗体规格 0.2ml
Porimin 前细胞胀亡受体诱导膜损伤蛋白抗体规格 0.2ml
PON1 芳香酯酶1(磷酶)抗体规格 0.1ml
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文献和实验相关实验
原代培养1.取新生3d以内BALB/c小鼠，断颈处死后立即投入75%酒精中消毒5min（虽有头部皮肤保护，但时间不要过长，所以事先要把准备工作做好之后再去杀老鼠）。2.D-Hank’s液漂洗后分离颅盖骨，刮除骨膜和结缔组织，DMEM清洗颅骨骨片并剪碎。（自我感觉碎一点好一些）3.加入0.25%胰蛋白酶（含0.02EDTA），37°恒温消化20min，吸出消化液，之后1mg/1mlI型胶原酶37°恒温消化20min后离心（1000r/min，5min），弃上清液。（消化时间自己摸索，之前我消化
实验材料： 1. 骨组织来源：新生或胚胎大鼠、兔、人类胚胎或手术切除之骨组织； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅡ型胶原酶溶液； 4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO3 调节至pH 7.2。 实验方法： 1. 取生后1—2d大鼠若干只，拉颈处死
养BMDC有好几个月了，看了2、3篇文献就开搞，发现论坛里还是有一些战友养这个。就想开个专题讨论贴，请新手老手都上来谈谈经验或者问些问题。集思广益，大家相互促进下。 我在论坛里看到因为有战友养DC看百把篇文献的，感到佩服又奇怪，就BMDC的培养我目前只知道有个经典版本和改良版本。 我用的是改良版本，参考文献改天附上（可能养这个的战友大多看过了）。 1. 取小鼠股骨胫骨，小鼠要年轻！（6W-8W，以前用只一年左右的养出来外形也张牙舞爪，但流式检测没有CD11c表达，很奇怪
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