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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
LymphocyteSeparationMedium(Human)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
200ml
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称 人外周血淋巴细胞分离液哪里有买
规格: 200ml
别名 人淋巴细胞分离液
英文名称 LymphocyteSeparationMedium(Human)
储存条件 RT,避光,有效期2年
单位200ml/瓶20瓶/箱
外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞和粒细胞密度较大,为1.090g/ml左右,而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090g/ml,血小板为1.030~1.035g/ml。为此,将葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡按一定比例混合,调整比重、
1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
人外周血淋巴细胞分离液哪里有买尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
100mL RIPA裂解液(强) RIPA Lysis Buffer(S) 4℃保存
250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.2,2X PBlec Washing Solution in PBS,pH7.2,2X 常温保存
改良MSRV培养基 MSRV Medium,Modified 250g
改良纤维二糖多粘菌素B多粘菌素E(mCPC)琼脂基础 用于创伤弧菌的选择性分离培养(GB/T4789.-2008)。 250g
15KU 微球菌核酸酶 Nuclease ,Micrococcal 4℃保存
2 ug pCMV-Tag 5B pCMV-Tag 5B 低温运输,-20℃保存
尿素酶 20支
5nmol 接头DNA(Hind Ⅲ-Sma I) Adaptors -20℃保存
1g 肝素钠 Heparin Sodium Salt 4℃避光保存
肠道菌增菌肉汤(EE) Enterobacteria Enrichment Broth 250g
HE琼脂平板 用于肠道致病菌特别是沙门氏菌和志贺氏菌的选择性分离培养。 90mmX20个
1600U WarmStart Bst DNA聚合酶
1瓶 VERO C1008(E6)细胞株 VERO C1008(E6) 低温运输和保存
双料乳糖胆盐(含中和剂)培养基 Double Lactose Bile Medium 250g
李氏菌增菌肉汤(LB2) 英文名称:Listeria Enrichment Broth Base 产品规格:9ml*20支/包
1g 乙酰丁香 Acetosyringone 室温保存
XLD培养基平板(9cm) Xylose Lysine Desoxycholate Medium 10个/包
人外周血淋巴细胞分离液哪里有买3,3'-二基联萘 3,3'-Dimethylnaphthidine 13138-48-2 质量规格:>97%,进分
达泊西汀(混旋) Dapoxetine hydrochloride 119356-77-3 质量规格:>99%,混旋
顺式-β-羟基它莫西芬 cis-β-Hydroxy Tamoxifen 97151-04-7 质量规格:美国进口
DMEM (低) 10×1L 盒
Maconkey Agar 麦康凯琼脂 250g 瓶
L(-)-二酰酒石酸一水(>98%,BR) L-(-)DBTA, Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate 608-56-9 质量规格:>98%,BR
Xylene Cyanol FF 二青FF 5g 瓶
茴香烯(分析标准品,用于萜烯分析,≥99.5% (GC)) trans-Anethole 4180-23-8 质量规格:分析标准品,用于萜烯分析,≥99.5% (GC)
Paclitaxel 紫杉醇 33069-62-4 20mg
胆固醇戊基碳酸酯 Cholesterol Amyl Carbonate 15455-79-5 质量规格:
光萼野百合碱(标准品) Usaramine 15503-87-4 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Palmitic acid 棕榈酸-十六烷酸 096 20mg
8-羟基喹哪啶(>98%,BR) 8-Hydroxyquinaldine 826-81-3 质量规格:>98%,BR
香草(熔点标准品) Vanillin 1-33-5 质量规格:熔点测定
地尔硫卓 Diltiazem 42399-41-7 质量规格:美国进口
鸡IgG干粉 10mg 支
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