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34
- 英文名:
Lipofectamine?2000TransfectionReagent
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详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
0.75ml
产品名称 脂质体2000Invitrogen原装多少钱
规格: 0.75ml
英文名称 Lipofectamine?2000TransfectionReagent
储存条件 2-8℃
单位盒
Lipofectamine2000转染试剂是一种多用途转染试剂,可在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高效转染。研究人员可使用Lipofectamine2000试剂进行基于siRNA和shRNA的基因敲除实验及基因表达研究。Lipofectamine2000是LifeTechnologies提供的用于siRNA和质粒DNA共转染的最佳试剂。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
2 ug pTRE2 hyg pTRE2 hyg 低温运输,-20℃保存
50T 玉米MS PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
明胶生化管 英文名称: 产品规格:20支/盒
5mL 成骨细胞生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
125mL Triton Lysis Buffer,2X Triton Lysis Buffer,2X 常温保存
SOB培养基 英文名称:SOB Medium 产品规格:250g
100mL 动物DNAout Animal DNAOUT 常温
2 ug pQE-31 pQE-31 低温运输,-20℃保存
50T 马疱疹病毒1型PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
L型细菌高渗盐增菌培养基 英文名称:L-Bacterial Hypertonic Salt Broth 产品规格:250g
10mL His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 Protease Inhibitor for His-tagged Protein -20℃保存
1mL RNA Loading Buffer,6X RNA Loading Buffer,6X 常温保存
麦芽汁琼脂 Malt Extract Agar 250g
无盐胰胨水 英文名称: 产品规格:20支
2 ug pLVX-EF1α-AcGFP1-N1 pLVX-EF1α-AcGFP1-N1 低温运输,-20℃保存
250mL Zinc-Fixative Zinc-Fixative 常温保存
抗生素检定培养基9号 英文名称:Antibiotic Agar NO.9 产品规格:250g
脂质体2000Invitrogen原装多少钱圆盖玻片 直径24mm 1片 盒
聚乙二醇1 PEG 1 25322-68-3 质量规格:分子量9,0~11,0
Tetrahydrocucumin 四姜黄素 36062-04-1 20mg
脱紫堇碱;去紫堇碱(标准品) Dehydrocorydaline 345-16-0 质量规格:HPLC≥97%,标准品
2,4-氨基-6-氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T)) 2,4-Diamino-6-methoxy-1,3,5-triazine 28-45-4 质量规格:>98.0%(T)
α-Linolenic acid α-亚麻酸 440-1 20mg
Random Primers 随机引物 20ug 支
替米考星 Tilmicosin 108050-54-0 质量规格:干品纯度≥90.0%,干品含量≥85.0%,USP34
米替福新(标准品) Miltefosine 0-85-6 质量规格:HPLC≥>98%,标准品
米托蒽醌(标准品) Mitoxantrone HCl 70476-82-3 质量规格:HPLC>98%,标准品
精 Spermine 71-44-3 质量规格:>98%,BR
巴柳氮钠(标准品) Balsalazide 80573-04-2 质量规格:含量测定
醋酸棉酚 Gossypol-acetic acid 12542-36-8 质量规格:>97.5%,BR
五味子丙素(标准品) Schisandrin C 61301-33-5 质量规格:HPLC≥98%,标准品
薯蓣皂苷;重楼皂苷III(标准品) Dioscin 19057-4 质量规格:HPLC≥98.0%,标准品
依度沙班;伊多塞班 Edoxaban 480449-70-5 质量规格:>99%,BR
1.脂质体2000Invitrogen原装多少钱具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
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文献和实验docado 我要做乳腺癌细胞siRNA瞬时转染,不知道哪里的转染试剂比较好用、可靠。 Invitrogen公司的脂质体LipofectamineTM-2000 德国QIAGEN公司Attractene Transfection Reagent 北京英恩格公司的EntransterTM -R 这些是否有人用过,转染
一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector(OpenBiosystems) 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因(pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2)和包被质粒(pMD2.G)(Addgene) 3. 脂质体2000(Invitrogen) 4.OptiMEM无血清培养基(Invitrogen) 5. 293T包装细胞(ATCC)
Invitrogen的王牌:Lipofectamine 2000转染试剂
步骤快速简便: (1)DNA-阳离子脂质体试剂的复合体可以直接加入到细胞培养 基中,有血清也不怕 (2)转染后不需要除去Lipofectamine 2000试剂,无需换培养基 操作流程 事实上Lipofectamine系列产品操作流程都是又快又简单:稀释DNA以及Lipofectamine 2000,混合2种稀释液保温20分钟,加入培养细胞中孵育24-96小时检测结果。下面是Invitrogen提供的详细流程和注意事项。 转染前一天,胰酶
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