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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
41
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
1.脱纤维马血(无菌)多少钱具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及研发性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
产品名称 脱纤维马血(无菌)多少钱
规格: 100ml
储存条件 2-8℃
单位 瓶
需要现采集,货期一周,保质期30天,现定现用。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
1瓶 ME-180细胞株 ME-180 低温运输和保存
含青霉素酶TSA培养基平板 7cm/个*10
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氯化钠营养琼脂 NaCl Nutrient Agar 250g
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菌种培养基 用于常用的菌种传代及室温培养用(GB/T20444.2006和SN0179-92)。 100
脱纤维马血(无菌)多少钱卡培他滨(标准品) Capecitabine 154361-50-9 质量规格:HPLC>98%,标准品
茄尼醇(标准品) Solanesol 13190-97-1 质量规格:HPLC≥97%,标准品
蛋黄粉 250g 瓶
D-Glucosamine D-氨基葡萄糖 10g 瓶
4-去氧基-4-氯代奥美拉唑硫化物 4-Desmethoxy-4-chloro Omeprazole Sulfide 2207-74-4 质量规格:美国进口
柴胡皂苷B2(标准品) Saikosaponin B2 516-41-9 质量规格:HPLC≥98%,标准品
桂美酸(标准品) CINAMETIC ACID 35703-32-3 质量规格:溶出度检查
硝醇(标准品) Bronopol 52-51-7 质量规格:分析标准品
阿昔洛韦钠盐 Acyclovir sodium 69657-51-8 质量规格:美国进口
固黑K盐 Fast Black K Salt 7-47-8 质量规格:>80%,BR
L-精氨酸(标准品) L-Arginine 74-79-3 质量规格:HPLC≥98%,标准品
甘氨酸酯盐 Glycine methyl ester hydrochloride 5680-79-5 质量规格:>98%,BR
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MK-17,MK17 MK-17 955365-80-7 质量规格:>98%,Wee1激酶抑制剂
十三烷(Standard for GC,>99%(GC)) Tridecane 629-50-5 质量规格:Standard for GC,>99%(GC)
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文献和实验玻璃管中间,停留时间视玻璃管软化程度而定,由于玻璃管下端有一定重量,在受热软化后管就在重力作用下变细。用剪刀把玻璃管从中间细的地方剪断,这样一根玻璃管就成了 2 根玻璃针了,然后根据其质量好坏就可以套在微量进样器尖端给药了。 此方法只适用与没「拉管机」和拉管技术的情况下;由于是非专业操作,失败的机率很高(一下就把管烧断了或者把管烧的太细,管尖没有硬度),不过熟能生巧。假廉物美,失败 10 次有一根好的就赚了。想想,一根玻璃管多少钱,一个火机多少钱,一个拉管机多少钱,定做一根针多少钱。运用
错误常会造成细胞无法存活。 5. 何谓FBS, FCS, CS, HS ? FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思, 两者都是指胎牛血清, FCS 乃错误的使用字眼, 请不要再使用。CS (calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。 6. 培养细胞时应使用5 % 或10% CO2?或根本没有影响? 一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH
水中。以0.22μm无菌过滤膜过滤灭菌。分装100 ml至瓶中,保存于 -70℃。 · 液体培养基 (1 liter) :称取21 g之Difco PPLO broth,0.02 g phenol red 于600ml蒸馏水中,加热搅拌溶解之。灭菌121℃,15分钟。待温度降低至室温后,于无菌操作台内加入200ml马血清,100ml之15% yeast extract solution,及100ml解涷之10x stock solution,混合均匀后,分装至已灭菌之有盖螺旋试管中,10ml/管。保存
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