- ¥299 - 2299
- ABclonal
- 中国
- RK20533
- 2025年09月01日
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- 技术资料
- 保存条件：
-20°C
- 英文名：
Exonuclease III (E. coli)
- 库存：
100
- 供应商：
ABclonal
- 规格：
2500 U/5000 U/25000 U
| 规格： | 2500 U | 产品价格： | ¥299.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5000 U | 产品价格： | ¥579.0 |
| 规格： | 25000 U | 产品价格： | ¥2299.0 |
产品描述
Exonuclease III (E.coli) (Exo III) 能降解dsDNA的平末端、5'-突出末端或切口，从dsDNA链的3'-OH末端逐步释放5'-单磷酸核苷酸，产生ssDNA片段。每次Exo III酶结合到dsDNA上时，都有单个核苷酸被移除，从而导致DNA分子群体中不同程度的末端渐进缺失。尽管Exo III可以将dsDNA上的Nicks外切成Gaps，但Exo III最佳的底物是平末端dsDNA或3'-末端凹陷dsDNA。 3'-突出末端的dsDNA能阻止Exo III降解，其抵制程度取决3'-突出末端的突出长度，突出4个或更长的碱基能完全阻止Exo III的酶切。同时，该酶对单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。
Exo III的酶活性部分依赖于DNA的螺旋结构，并表现出序列依赖性(C>A=T>G)。温度、盐浓度和酶/DNA比值对酶活性有很大影响，所以对不同的应用使用不同的反应条件。
Exo III还具有以下三种酶活性，如下：
3'-磷酸酶活性：切除3'-末端的磷酸基团，产生3'-OH基团。
RNase H活性：外切核酸酶活性，降解RNA-DNA杂合体中的RNA链。
AP-内切核酸酶活性：切割脱嘌呤或脱嘧啶位点(AP位点)的磷酸二酯键，产生5'-端无碱基的脱氧核糖5'-磷酸残基。
产品组分
| Exonuclease III (E. coli) (100,000 U/ml) | RM20521 |
| 10X ABuffer A | RM20125 |
产品信息
| 产品来源 | 来自 E.coli 的Exo III基因在大肠杆菌中表达和分离纯化得到。 |
|---|---|
| 应用 | DNA聚合酶的应用 |
| 活性定义 | 1活性单位(U)是指在50 μL反应体系中，37°C 30 min催化0.15 mM [3H]-dsDNA释放1 nmol酸不溶性物质所需的酶量。 |
| 保存条件 | 5 mM KPO4, 200 mM KCl, 5 mM β-ME, 0.05 mM EDTA, 200 μg/ml BSA, 50% Glycerol, pH 6.5 @ 25°C |
| 保存温度 | -20°C |
| 反应条件 | 1X ABuffer A, 37°C孵育 |
| 反应缓冲液或预混液 | 1X ABuffer A: 10 mM Bis-Tris-Propane-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, pH 7 @ 25°C |
| 热失活 | 70°C 加热 20 min |
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文献和实验在核酸水解酶中，是具有从分子链的末端顺次水解磷酸二酯键而生成单核苷酸作用的酶，与核酸内切酶相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的 3′端生成 5′ -单核苷酸的酶，及水解 5′端生成 3′ -单核苷酸的酶。前者有蛇毒磷酸二酯酶及大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等；后者有脾脏磷酸二酯酶、嗜酸乳杆菌（ Lac-tobacillus acidophilus）核酸酶。这些酶中还可以区别出从分子链的 3′末端或 5′末端开始切断和对单链 DNA或双链 DNA具有特异作用的酶。可利用这些酶水解
Transformation of E. coli by Electroporation
Materials: SOB medium E. coli host strain such as DH5α WB tRNA 5 M ammonium acetate
脾脏核酸外切酶spleen exonuclease，spleenphosphodiesterase
亦称脾脏磷酸二酯酶（spleen phosphodieste- rase）。系将具有 5′ -OH末端的 DNA和 RNA，从 5′末端向 3′方向不断使 3′ -核苷酸游离分解的酶。 EC3． 1． 16． 1。常从牛脾脏提纯的此种酶。高分子 DNA不易水解，但用 DNaseⅡ或普氏微球菌（ Micrococ-cus pyogenes）核酸酶处理，则可以完全水解。对碱基序列无特异性，但在 5′末端有磷酸单酯基则不水解。反应不需要 Mg2 ，但最适 pH在有 2× 10
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