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- 2025年07月14日
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- 详细信息
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33
- 英文名：
Z-VAD-FMK
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)哪家好
英文名称：Z-VAD-FMK
产品规格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
发货周期：1～3天
注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！
CAS号187389-52-2
别名Z-VAD(OMe)-FMK;Z-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK
纯度98.0%
分子量467.49
储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2-溴肉桂D-(+)-sn-1-O-arachidonoyl-glyceryl-3-phosphate (Arachidonoyl LPA)
4-羟-2,6-二C16 LysoPAF L-1016
顺式-1,2-二酰亚1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DLPC) L-1112
4-(三)1,2-Dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DMPC) L-1114
1,3,5-三(4-溴)1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DPPC) L-1116
二酰鸟嘌呤1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DSPC) L-1118
肟(的水溶,约2.4mol/L)1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DAPC) L-1120 CAS 61596-53-0
L-4-氧扁桃(2R)-1,1-difluoro-2-palmitoyloxy-3-phosphopropane
三络合物1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine, chloride CAS 328250-18-6
2--6-睛1,2-Dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DOPC)
caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)哪家好3,4-二 ACETOVERATRONE(RG)度97%rhBMP-2/BMP2 重组骨形态发生蛋白-2
3,4-二 DIMETHYLBENZALDEHYDE,3,4-(RG)度≥99%rh-BMP-7/BMP7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7;rhBMP-7
3,3'-二腈 3,3'-Oxydipropionitrile >98.0%(GC)度≥98%rHBsAg 重组肝病毒表面抗原
3,3'-二腈 3,3'-Oxydipropionitrile >98.0%(GC)度≥98%rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor
3,3'-二腈 3,3'-Oxydipropionitrile >98.0%(GC)度≥98%rhEGF(rh-Epidermal growth factor
3,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(RG)度≥95%rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag
3,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(RG)度≥90%Rho C(Ras homolog gene family member C
3,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(P)度≥95%RhoA (RhoA protein
克林Clindamycin phosphate保存20℃，避光规格200mg
多西环素Doxycycline保存20℃，避光规格200mg
头孢他啶Ceftazidime保存20℃，避光规格100mg
头孢噻肟Cefotaxime保存20℃，避光规格200mg
唑西林Oxacillin保存20℃，避光规格500mg
头孢克洛Cefaclor保存20℃，避光规格200mg
头孢曲松Of Qu Song保存20℃，避光规格200mg
右旋妥沙星Dextral Antofloxacin保存20℃，避光规格50mg
那沙星Nadifloxacin保存20℃，避光规格100mg
司帕沙星Sparfloxacin保存20℃，避光规格200mg
帕珠沙星Pazufloxacin保存20℃，避光规格100mg
培沙星Pefloxacin保存20℃，避光规格100mg
罗沙星Fleroxacin保存20℃，避光规格100mg
沙星Antofloxacin保存20℃，避光规格100mg
左沙星Levofloxacin保存20℃，避光规格100mg
操作步骤(仅供参考)：
1、caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)哪家好
英文名称：Z-VAD-FMK
产品规格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
发货周期：1～3天
注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！
CAS号187389-52-2
别名Z-VAD(OMe)-FMK;Z-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK
纯度98.0%
分子量467.49
储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2-溴肉桂D-(+)-sn-1-O-arachidonoyl-glyceryl-3-phosphate (Arachidonoyl LPA)
4-羟-2,6-二C16 LysoPAF L-1016
顺式-1,2-二酰亚1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DLPC) L-1112
4-(三)1,2-Dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DMPC) L-1114
1,3,5-三(4-溴)1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DPPC) L-1116
二酰鸟嘌呤1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DSPC) L-1118
肟(的水溶,约2.4mol/L)1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DAPC) L-1120 CAS 61596-53-0
L-4-氧扁桃(2R)-1,1-difluoro-2-palmitoyloxy-3-phosphopropane
三络合物1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine, chloride CAS 328250-18-6
2--6-睛1,2-Dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DOPC)
caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)哪家好3,4-二 ACETOVERATRONE(RG)度97%rhBMP-2/BMP2 重组骨形态发生蛋白-2
3,4-二 DIMETHYLBENZALDEHYDE,3,4-(RG)度≥99%rh-BMP-7/BMP7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7;rhBMP-7
3,3'-二腈 3,3'-Oxydipropionitrile >98.0%(GC)度≥98%rHBsAg 重组肝病毒表面抗原
3,3'-二腈 3,3'-Oxydipropionitrile >98.0%(GC)度≥98%rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor
3,3'-二腈 3,3'-Oxydipropionitrile >98.0%(GC)度≥98%rhEGF(rh-Epidermal growth factor
3,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(RG)度≥95%rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag
3,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(RG)度≥90%Rho C(Ras homolog gene family member C
3,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(P)度≥95%RhoA (RhoA protein
克林Clindamycin phosphate保存20℃，避光规格200mg
多西环素Doxycycline保存20℃，避光规格200mg
头孢他啶Ceftazidime保存20℃，避光规格100mg
头孢噻肟Cefotaxime保存20℃，避光规格200mg
唑西林Oxacillin保存20℃，避光规格500mg
头孢克洛Cefaclor保存20℃，避光规格200mg
头孢曲松Of Qu Song保存20℃，避光规格200mg
右旋妥沙星Dextral Antofloxacin保存20℃，避光规格50mg
那沙星Nadifloxacin保存20℃，避光规格100mg
司帕沙星Sparfloxacin保存20℃，避光规格200mg
帕珠沙星Pazufloxacin保存20℃，避光规格100mg
培沙星Pefloxacin保存20℃，避光规格100mg
罗沙星Fleroxacin保存20℃，避光规格100mg
沙星Antofloxacin保存20℃，避光规格100mg
左沙星Levofloxacin保存20℃，避光规格100mg
操作步骤(仅供参考)：
1、caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验相关实验
0.1% 2、注意caspase抑制剂要一直存在，并非只存在1个小时。 3、加药过程动作要快且轻柔，避免干板或造成过度的机械性损伤。 4、估计你用的是Z-VAD-fmk，你的细胞系的应用浓度需要有文献支持，我个人认为你的浓度似乎高了。 5、需要重复：确定凋亡检测方法选择正确，重复性好，结果方能可信。 祝顺利！ michaelmichael 如果你是用96孔板做的MTT，不知道你的药物是如何加入的？是把重复孔的药物混合
性的Caspase-8 抑制剂，它能不可逆地与活细胞内的活化的Caspase-8 结合。可以通过流式细胞仪、荧光酶标仪或荧光显微镜测量荧光强度（激发波长：485nm，发射波长：535nm）检测Caspase-8 的活性。整个实验约需1.5 小时。试剂盒中提供：已标记的caspase 抑制剂(FITC-IETD-FMK), 清洗缓冲液, 未标记的caspase 抑制剂(Z-VAD-FMK) 25、Caspase-8 Detection Kit (Red-IETD-FMK) ，红色荧光 目录号：QIA
，与酶/抑制剂复合物的巯基半缩醛以氢键结合的His237，以及可以稳定反应中间物氧阴离子的Gly238。另外，Arg179、Arg341、Gln383和Ser347形成容纳P1Asp的“口袋”，Ser339靠近Cys285的巯基，以氢键结合P1位的酰胺。与P2~P4作用的氨基酸残基则变异比较大，这可能是各个成员识别不同底物的特异性之所在。在活性Cys周围的氨基酸序列也很保守，一般都有Gln-Ala-Cys-Arg-Gly(QACRG)五肽序列，在caspase-8、caspase-10中为QACQG
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