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- 2025年07月08日
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- 文献和实验
- 技术资料
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35
- 英文名：
Ixazeomib
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10mM×0.2ml|5mg|25mg
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：20S proteasome抑制剂(埃沙佐米)(MLN2238)规格
英文名称：Ixazeomib
产品规格：10mM×0.2ml|5mg|25mg
发货周期：1～3天
CAS1072833-77-2
分子式C14H19BCl2N2O4
分子量361.03
纯度99.9%
MLN2238是氮端加帽的二肽亮氨酸硼酸，抑制20S蛋白酶体的糜蛋白酶类(β5)水解位点，IC50为3.4nM，Ki值为0.93nM。更高浓度时，MLN2238也抑制20S蛋白酶体的caspase类水解(β1)位点和胰蛋白酶类水解(β2)位点，IC50分别为31nM和3.5μM。MLN2238是蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂，这种可逆性存在时间依赖性。MLN2238抑制Calu-6细胞，IC50为9.7nM。MLN2238作用于肿瘤细胞，为蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂。MLN2238和Bortezomib都为蛋白酶体的可逆抑制剂，都存在时间依赖性，但是MLN2238作用于蛋白酶体的分离半衰期比Bortezomib作用快6倍(分别为18和110分钟)。MLN2238从蛋白酶体中分离比Bortezomib快，与Proteasome-Glo实验中蛋白酶体活性更快恢复一致。MLN2238比Bortezomib具有更高的肿瘤药效。MLN2238是MLN9708的生物活性形式。
储存条件-20℃，有效期12个月。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
双A型二二CLIA Kit for Fibulin 1 (FBLN1)
2-羟-6-烟CLIA Kit for Collagen Type XII (COL12)
异己酰CLIA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 (BMP10)
4-氧羰酰CLIA Kit for Interleukin 35 (IL35)
3-羟-4-腈CLIA Kit for Toll Like Receptor 3 (TLR3)
7,8-二羟黄CLIA Kit for Hepcidin (Hepc)
3,5-二唑-1-咪CLIA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 9 (ADAM9)
3-溴-5--6-啶CLIA Kit for Nuclear Factor Kappa B (NFkB)
2--3--5-啶CLIA Kit for Tetraspanin 30 (TSPAN30)
2--3--5-啶CLIA Kit for Secretory Leukocyte Peptidase Inhibitor (SLPI)
20S proteasome抑制剂(埃沙佐米)(MLN2238)规格APHANIZOPHYLL (SH)度≥98% Metal ion transporter 拟南介离子转运蛋白(抗原
ANDROSTERONE HEPTANOATE(P)度≥98% Metronidazole/BSA 唑偶联牛血清白蛋白
ANDROSTERONE HEPTANOATE(P)度≥98% Metronidazole/KLH 唑偶联牛血蓝蛋白
ANDROSTAN-17-ONE, 5a-(P)度≥98% Metronidazole/OVA 唑偶联鸡卵白蛋白
ANAGYRINE PERCHLORATE(P)(PLEASE CALL)度≥98% Mfn1 (Mitofusin1
ANAGYRINE PERCHLORATE(P)(PLEASE CALL)度≥98% MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor
AMMONIUM HYDROXIDE(RG)(PLEASE CALL)度≥98% MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor
AMINO ACIDS, NON-ESSENTIAL STANDARDS KIT(P)度≥97% MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A
二庚ATwo phenyl heptane A保存20℃，避光规格20mg
20（S）原参三20 (S) protopanaxatriol three alcohol保存20℃，避光规格20mg
罗汉苷VMogroside V保存20℃，避光规格20mg
（R，S）告依春(R, S) goitrin保存20℃，避光规格20mg
派可林Pipecolic acid保存20℃，避光规格20mg
薏苡仁油Coix seed oil保存20℃，避光规格0.2ml
20（s)参皂苷Rh220 (s) ginsenoside Rh2保存20℃，避光规格20mg
20(s)原参二20 (s) protopanaxadiol保存20℃，避光规格20mg
Ethyl acetate保存20℃，避光规格1ml
苦玄参苷IAPicfeltarraenin IA保存20℃，避光规格20mg
正Butanol保存20℃，避光规格1ml
当药苷Sweroside保存20℃，避光规格20mg
6羟7香豆6 hydroxy 7 methoxy coumarin保存20℃，避光规格20mg
6，7二香豆6, 7 two methoxy coumarin保存20℃，避光规格20mg
7羟香豆7 hydroxy coumarin保存20℃，避光规格20mg
操作步骤(仅供参考)：
1、20S proteasome抑制剂(埃沙佐米)(MLN2238)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：20S proteasome抑制剂(埃沙佐米)(MLN2238)规格
英文名称：Ixazeomib
产品规格：10mM×0.2ml|5mg|25mg
发货周期：1～3天
CAS1072833-77-2
分子式C14H19BCl2N2O4
分子量361.03
纯度99.9%
MLN2238是氮端加帽的二肽亮氨酸硼酸，抑制20S蛋白酶体的糜蛋白酶类(β5)水解位点，IC50为3.4nM，Ki值为0.93nM。更高浓度时，MLN2238也抑制20S蛋白酶体的caspase类水解(β1)位点和胰蛋白酶类水解(β2)位点，IC50分别为31nM和3.5μM。MLN2238是蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂，这种可逆性存在时间依赖性。MLN2238抑制Calu-6细胞，IC50为9.7nM。MLN2238作用于肿瘤细胞，为蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂。MLN2238和Bortezomib都为蛋白酶体的可逆抑制剂，都存在时间依赖性，但是MLN2238作用于蛋白酶体的分离半衰期比Bortezomib作用快6倍(分别为18和110分钟)。MLN2238从蛋白酶体中分离比Bortezomib快，与Proteasome-Glo实验中蛋白酶体活性更快恢复一致。MLN2238比Bortezomib具有更高的肿瘤药效。MLN2238是MLN9708的生物活性形式。
储存条件-20℃，有效期12个月。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
双A型二二CLIA Kit for Fibulin 1 (FBLN1)
2-羟-6-烟CLIA Kit for Collagen Type XII (COL12)
异己酰CLIA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 (BMP10)
4-氧羰酰CLIA Kit for Interleukin 35 (IL35)
3-羟-4-腈CLIA Kit for Toll Like Receptor 3 (TLR3)
7,8-二羟黄CLIA Kit for Hepcidin (Hepc)
3,5-二唑-1-咪CLIA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 9 (ADAM9)
3-溴-5--6-啶CLIA Kit for Nuclear Factor Kappa B (NFkB)
2--3--5-啶CLIA Kit for Tetraspanin 30 (TSPAN30)
2--3--5-啶CLIA Kit for Secretory Leukocyte Peptidase Inhibitor (SLPI)
20S proteasome抑制剂(埃沙佐米)(MLN2238)规格APHANIZOPHYLL (SH)度≥98% Metal ion transporter 拟南介离子转运蛋白(抗原
ANDROSTERONE HEPTANOATE(P)度≥98% Metronidazole/BSA 唑偶联牛血清白蛋白
ANDROSTERONE HEPTANOATE(P)度≥98% Metronidazole/KLH 唑偶联牛血蓝蛋白
ANDROSTAN-17-ONE, 5a-(P)度≥98% Metronidazole/OVA 唑偶联鸡卵白蛋白
ANAGYRINE PERCHLORATE(P)(PLEASE CALL)度≥98% Mfn1 (Mitofusin1
ANAGYRINE PERCHLORATE(P)(PLEASE CALL)度≥98% MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor
AMMONIUM HYDROXIDE(RG)(PLEASE CALL)度≥98% MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor
AMINO ACIDS, NON-ESSENTIAL STANDARDS KIT(P)度≥97% MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A
二庚ATwo phenyl heptane A保存20℃，避光规格20mg
20（S）原参三20 (S) protopanaxatriol three alcohol保存20℃，避光规格20mg
罗汉苷VMogroside V保存20℃，避光规格20mg
（R，S）告依春(R, S) goitrin保存20℃，避光规格20mg
派可林Pipecolic acid保存20℃，避光规格20mg
薏苡仁油Coix seed oil保存20℃，避光规格0.2ml
20（s)参皂苷Rh220 (s) ginsenoside Rh2保存20℃，避光规格20mg
20(s)原参二20 (s) protopanaxadiol保存20℃，避光规格20mg
Ethyl acetate保存20℃，避光规格1ml
苦玄参苷IAPicfeltarraenin IA保存20℃，避光规格20mg
正Butanol保存20℃，避光规格1ml
当药苷Sweroside保存20℃，避光规格20mg
6羟7香豆6 hydroxy 7 methoxy coumarin保存20℃，避光规格20mg
6，7二香豆6, 7 two methoxy coumarin保存20℃，避光规格20mg
7羟香豆7 hydroxy coumarin保存20℃，避光规格20mg
操作步骤(仅供参考)：
1、20S proteasome抑制剂(埃沙佐米)(MLN2238)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验相关实验
化学活性；且放射性碘的半衰期较短，标记物放置后因衰变使放射性降低，因而需要经常制备标记物或要求能定期提供放射性碘标记都能适用，放射性碘放出γ―射线，用一般晶体闪烁计数器就能获得较高效率而精确的测量，测量操作也很简单。由于这些突出的优点，目前在放射免疫分析中，使用放射性碘标记物最多。 从应用角度来看，131 I和125 I又各有其优缺点，可根据实验的要求、仪器的条件和放射性碘制剂的规格等条件合理选用。但相对而言，125 I有较多的优点，一是半衰期适中，允许标记化合物的商品化及贮存应用一段时间；二
1-2min，清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影，清水冲净晾干，标定Marker，进行分析与扫描。 2．AP-NBT/BICP显色法： 每片NBT/BICP可溶解于30ml水中，使用前将一片分装在30个 EP管中，每张3×9cm的膜取一管配成1ml即可。将PBST或TTBS洗涤过的膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于NBT/BICP溶液液滴上，并用不透明物体（如报纸）遮挡光线，显色20s后每10s观察一次，至条带明显或有本底出现时将膜揭起置去离子水中漂洗后放滤纸上晾干即可
【资源】个人整理 Western Blot（步骤简略，但注意事项、经验总结、基本原理很全面）
）遮挡光线，显色20s后每10s观察一次，至条带明显或有本底出现时将膜揭起置去离子水中漂洗后放滤纸上晾干即可观察与扫描。七．增强敏感性若目的条带未出现，或很淡，可试用以下方法增强发光强度：1． 用清水漂洗膜数分钟，重加发光液进行曝光，可延长曝光时间。2． 将膜在PBST或TTBS中洗涤30min或更长，期间至少换2次液。3． 封闭40~60min4． 一抗杂交，室温1h。37℃ 1h 会更强，但可能增加非特异条带。5． PBST或TTBS洗膜20min，期间换2次液。6． 二抗杂交，37
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