Human total Vaspin ELISA Kit

碧云天的Human Vaspin/Serpin A12 ELISA Kit (Human Vaspin/Serpin A12 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人丝氨酸蛋白酶抑制剂酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Vaspin的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为46.8pg/ml，与人的Serpin A1、Serpin A3、Serpin A4、Serpin A5、Serpin A6、Serpin A9、Serpin A11、Serpin C1、Serpin D1、Serpin E1、Serpin E2、Serpin F2、Serpin F1、Serpin G1等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
人丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)，又称Serpin A12，是一种分子量在45-50kDa的分泌型脂肪因子，主要参与维持胰岛素敏感性。成熟的人Vaspin与小鼠和大鼠Vaspin具有61%的氨基酸同源性。Vaspin主要由内脏脂肪细胞、皮下脂肪细胞、胃腺及表皮脂肪细胞和胚胎中的脂肪细胞表达。给肥胖大鼠注射Vaspin能够提高大鼠糖耐量和胰岛素敏感性，能保证血管内皮细胞免受游离脂肪酸的损害。在女性体内游离Vaspin浓度会高于男性。在男性代谢综合征病人和女性钙化冠状动脉狭窄病人体内Vaspin会出现升高。体内Vaspin水平与胰岛素抵抗、BMI指数、肾功能状态、肝脏纤维化程度和HDL浓度相关。禁食或注射胰岛素后，Vaspin浓度会降低，长期的体能训练则会使Vaspin浓度升高。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人Vaspin/Serpin A12的浓度，其原理见图1。人Vaspin/Serpin A12特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人Vaspin/Serpin A12会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人Vaspin/Serpin A12抗体后，生物素化抗人Vaspin/Serpin A12抗体与人Vaspin/Serpin A12结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人Vaspin/Serpin A12浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人Vaspin/Serpin A12浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PV970-1	人Vaspin/Serpin A12抗体预包被板	8孔×12条
PV970-2	样品分析缓冲液	5ml
PV970-3	标准品稀释液	10ml
PV970-4	人Vaspin/Serpin A12标准品	2-4瓶
PV970-5	人Vaspin/Serpin A12生物素化抗体	10ml
PV970-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PV970-7	洗涤液(20X)	30ml
PV970-8	TMB溶液	10ml
PV970-9	终止液	5ml
PV970-10	封板膜(透明)	2张
PV970-11	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。