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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
36
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途
中性脂肪染色,主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着。
注意事项
主要由苏丹三、乙醇等组成,染色后脂肪呈橘红色,细胞核呈淡蓝色。
储存条件室温,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:1.苏丹Ⅲ染色液-C液规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品:
3-[[5--2-(1-)]氧]-1,2-二醇Digoxin
3,5-二-4-酰Cholesterol
频那醇酯(2-Aminoethyl)phosphinic acid
4-溴-2,5-二Dehydroabietic acid
2-(5-溴啶-2-)2-腈trans-Caryophyllene
R-(+)-2-(4-羟氧)酯Betaine
3--5-氧羰4-Hydroxybenzoic acid
4--3-(异酰)3,4-Dihydroxybenzoic acid
4--3-(-)-Epigallocatechin gallate
氧叉二二酯Pseudoginsenoside RT5
苏丹Ⅲ染色液-C液规格去穿心莲内酯 DEOXYANDROGRAPHOLIDE(RG)度95%HDAC1/HD1(histone deacetylase 1
去木香内酯 DEHYDROCOSTUS LACTONE(RG)度≥98% HER2 receptor(erbB-2 isoform 2
去木香内酯 DEHYDROCOSTUS LACTONE(RG)度≥95% HER2 receptor(NT
去抗坏血 DEHYDROASCORBIC ACID(RG)度≥98% HER2 receptor(NT
去胆 DEHYDROCHOLIC ACID(RG)度≥97% HEV 型肝炎病毒(抗原
去表雄 DEHYDROISOANDROSTERONE(DHEA)(RG)度≥98% HGF(hepatocyte growth factor
去表雄 DEHYDROISOANDROSTERONE(DHEA)(AS)度≥98% HGV(Hepatitis G vivus
去醉椒素 DESMETHOXYYANGONIN(P)度≥96%HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P
毒扁豆;PhysostigMine CAS号 57476 规格 20mg 订购|咨询
冬凌草素;Ponicidin CAS号 52617375 规格 10mg 订购|咨询
多紫杉;Docetaxel CAS号 114977285 规格 20mg 订购|咨询
大黄素葡萄糖苷; CAS号 规格 20mg 订购|咨询
;Digoxin CAS号 20830755 规格 20mg 订购|咨询
L蛋;LMethionine CAS号 63683 规格 100mg 订购|咨询
多舌飞蓬苷;6’OCaffeoyle CAS号 规格 20mg 订购|咨询
香树脂双葡萄糖苷;Syringare CAS号 66791773 规格 20mg 订购|咨询
当药宁;Swertianin CAS号 20882751 规格 20mg 订购|咨询
短葶山麦冬皂苷C; liriope mu CAS号 87480464 规格 20mg 订购|咨询
丹参新 ; Miltirone CAS号 27210577 规格 10mg 订购|咨询
丹C; Salvianolicaci CAS号 115841093 规格 20mg 订购|咨询
德尔塔林 ; deltaline CAS号 规格 20mg 订购|咨询
灯盏花素 ; apigenin7 CAS号 规格 20mg 订购|咨询
大戟二;euphol CAS号 514476 规格 20mg 订购|咨询
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混匀后即得。于4℃储存备用。 染色步骤: 1. 用Hanks液漂洗盖玻片3次; 2. 用甲醛钙固定液固定20min; 3. 用蒸馏水漂洗盖玻片3次; 4. 用70%乙醇将盖玻片冲洗3次; 5. 用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品,染色10—30min; 6. 用70%乙醇漂洗盖片3次; 7. 用甘油明胶封片后观察。 结果: 原代细胞含脂类的区域呈橘红色。
小时后即可使用。 注:此液5天内失效,如此看来,浪费较大,建议配制70%酒精饱和液,或纯丙酮和70%酒精饱和液,它们使用方便,且不易失效。 结果:脂肪呈猩红色,比苏丹Ⅲ更为清晰。 三、油红染色法: 油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,并且优于苏丹Ⅳ。 试剂配制: 油红O 0.5g 异丙醇(含量98%) 100ml 此为油红饱和液,可长期保存备用。 染色步骤: (1)冻切片 (2)蒸馏水充分洗涤
一、材料与仪器30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液,PH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液,PH6.8;电泳缓冲液,PH8.3;10%SDS溶液;10%过硫酸铵溶液;样品处理液;染色液;脱色液;电泳玻璃板,电泳电源架,电泳槽,电泳仪等;蛋白Mark。二、方法与步骤1) 分离胶和浓缩胶配制按下表比例分别配制分离胶和浓缩胶:2)凝胶板的准备a) 洗板:将洗洁精用温水稀释后,用它浸透海绵擦洗二块玻璃板,然后用自来水洗净,再用酒精将板擦干。b)配板
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